参芪粉在提高母猪免疫方面的应用
参芪粉在提高母猪免疫方面的应用[20200507191522]
摘要：母猪是当前养猪业的核心，提高母猪生产水平具有十分重要的意义，而母猪免疫力是影响母猪生产水平的重要因素。参芪粉为国家三类新兽药，由黄芪、党参复方提取，是依靠中药理论，结合中国实际情况，研发和生产的高效免疫增强剂。本试验拟对参芪粉在提高母猪免疫方面的应用进行研究，包括检测：母猪初乳免疫球蛋白G（immunoglobulin G，IgG）的含量、母猪断奶后返情复配的情况、仔猪初生重和断奶重及育成率。
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
关键字:母猪；免疫力；初乳；仔猪
目录
摘要 1
关键词 1
Abstract 1
Key words 1
引言 1
1 材料和方法 2
1.1材料 2
1.1.1试验药品和对照药品 2
1.1.2主要试剂 2
1.1.3主要仪器 2
1．2 母猪初乳免疫球蛋白IgG的变化 2
1.2.1 动物分组与处理 2
1.2.2 母猪初乳中IgG的提取 2
1.2.3 母猪初乳中IgG的纯化 2
1.2.4 母猪初乳中IgG含量的测定 3
1.3对母猪断奶后返情复配的影响 3
1.3.1动物分组与处理 3
1.3.2母猪配种的一般步骤 3
1.4 对仔猪断奶重及育成率的影响 3
1.4.1动物分组与处理 3
1.4.2 乳猪、仔猪饲喂 3
2结果与分析 4
2.1 母猪初乳中IgG的变化结果 4
2.2 母猪断奶后返情复配的影响结果 5
2.3 仔猪断奶重及育成率的影响结果 5
3 讨论 6
致谢8
参考文献9
表14
表 2 5
表 3 5
图 1 4
参芪粉在提高母猪免疫方面的应用
引言
现在一般衡量母猪群繁殖性能最常用的指标是“断奶仔猪数/母猪/年”（PSY）。这个指标又是由“分娩 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
窝数/母猪/年”和“断奶仔猪数/窝”两个指标所决定。随着养猪业的发展，规模化养猪已大势所趋。疾病、品种、饲料是发展养猪生产面临的主要问题，其中最主要的是猪病的预防与控制。我国养猪疾病防治基础差，猪病种类繁多，疫苗、药物质量相对较差，未形成适合的养殖体系。建立与健全现代化中国养猪的疾病防疫防控模式，改变有病医病的不良循环，从服务生产的角度思考问题，整体提升猪群的抗病力、生产力与繁殖力，才能从根本上解决问题。这一切的核心是母猪，而母猪的免疫是影响母猪生产与生长性能的重要因素。就目前中国养猪业现状来看，用什么药物来提高母猪免疫，从而达到改善母猪生产性能、提升效果又如何是一个具有实际意义的研究方向。本实验通过用参芪粉和奥奇素两种药物饲喂母猪，通过对比检测参芪粉在提高母猪免疫方面影响，包括：母猪初乳中 IgG 的变化、母猪断奶后返情复配的影响、仔猪初生重和断奶重及育成率的影响。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 试验药品和对照药品 试验药品 参芪粉，由无锡正大畜禽有限公司研制提供。
对照药品 奥奇素，市售，美国奥特奇公司生产。
1.1.2 主要试剂 氯化钠，正辛酸，氢氧化钠，三氯醋酸，盐酸，Tris-HCL，无水乙酸，醋酸，考马斯亮蓝，甘油，甘氯酸，溴酚蓝，过硫酸铵，乙酸钡，SDS，DEAE-52，疏基乙醇。
1.1.3 主要仪器 电泳仪，紫外可见分光光度计，数显恒温水浴锅，真空干燥箱，电子精密天平，自动液相色谱层析仪，低速大容量离心机，酸度计，层析柱，电热恒温古风干燥箱。
母猪发情鉴定仪，大吨位电子称。
1.2 母猪初乳中IgG的含量
1.2.1 动物分组与处理 选取猪场 2 0 头同一日龄配种的经产母猪，尽量保证经产胎次一致，试验组母猪在产前 3 0 d 开始在母猪饲料中添加参芪粉（产前型）200 g/t ，产后整个哺乳期添加参芪粉200 g/t ；对照组母猪产前 30 天至整个哺乳期在母猪料中已加奥奇素1 kg/t 。两组分别于产后检测 72 h 时每头母猪初乳中的免疫球蛋白（IgG）。
1.2.2 母猪初乳中IgG 的提取——正辛酸法 挤奶前颈部肌注 OXT ( 催产素 )，采集奶样，准确量取初乳40 ml于500 ml烧杯中，加入60 mmol/L pH4.0醋酸缓冲液160 ml，用氢氧化钠溶液调到pH 4.5。
每毫升稀释液加入25 μl正辛酸，在磁力搅拌条件下缓慢加入正辛酸，室温搅拌30min。在4℃，5000 r/min 离心30min，弃去沉淀。
上清液4℃ 预冷，每1ml上清液加0.227 g硫酸铵，缓慢加入硫酸铵粉末，边加边搅拌，室温下继续搅拌30 min，5000 r/min离心15 min。
将沉淀溶于20ml生理盐水中，透析过滤，离心去沉淀，上清液即为粗提IgG。
1.2.3 母猪初乳中IgG 的纯化 将上述IgG 粗品溶于少量生理盐水后装入透析袋，悬于装有0.01 ml/L，pH 7.4的PBS大烧杯中，于磁力搅拌器上4℃透析24 h，每6 h换一次液。
取2g预处理的DEAE-52纤维素，装成1.5乘以30 cm，柱床高25 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
cm层析柱。准备缓冲液A（25 mmol/L Tris-HCL，35 mmol/L NaCl，pH8.8）平衡。取2 ml上述层析去盐母液进层析柱，上样后先用缓冲液A平衡，至流出液在280 nm波长洗脱曲线变得平直为止。以等量缓冲液A和缓冲液C（25 mmol/L Tris-HCL，500 mmol/L NaCl，pH 8.8 ）连续梯度洗脱，控制流速1ml/min。上样15 min后分步收集并记录波峰，2 ml/管，合并同一波峰收集管，再用PBS溶液透析，并进行分析鉴定。
1.2.4 母猪初乳中IgG 含量的测定——Folin-酚法 配制标准牛血清蛋白进行Folin-酚法实验，用分光光度计测定梯度浓度标准蛋白的OD280.以蛋白质的浓度为横坐标，OD280值为纵坐标，绘制标准曲线。各粗提 IgG 样品液定容至100 ml，按Folin-酚法操作，通过标准曲线计算样品的蛋白质浓度。
1.3 对母猪断奶后返情复配的影响
1.3.1 动物分组与处理 随机分层抽样选取200头近期分娩的经产母猪，均匀分布在各胎次，平均分为两组。试验组组在平时喂养饲料中添加参芪粉 200 g/t ，对照组在母猪饲料中添加奥奇素 1 kg/t 。分别记录每组母猪断奶后发情间隔和母猪断奶后第一情期发情配种率，并考察母猪发情状态。每日早7点、11点、下午3点、7点，观察分析记录并确定母猪是否发情，对发情母猪进行登记，并按程序辅助进行人工受精。
1.3.2 母猪配种一般步骤 公猪采精：将采精日公猪赶到采精室，先让其嗅、拱母猪台，用手抚摸公猪的阴部和腹部，当公猪性欲被刺激达到旺盛时，公猪主动伸出阴茎龟头来回抽动。用拇指和食指抓住螺旋体部分，其余三指予以配合，进行类似挤奶的律动捏动。弃去前部分和中间较稀的精清部分，采集精子后，1:10 进行稀释，加入精子活力剂。精子分装在 37℃ 保存，保存过程中应该使精子充分稀释，每隔1h 摇动精子，尽量不要长期储存。
[2] 高云航，李秀云，玄乃权，等.猪乳中抗猪瘟IgA、IgG、IgM抗体动态变化规律研究.中国预防兽医学报,2007,29(8):611-614.
摘要：母猪是当前养猪业的核心，提高母猪生产水平具有十分重要的意义，而母猪免疫力是影响母猪生产水平的重要因素。参芪粉为国家三类新兽药，由黄芪、党参复方提取，是依靠中药理论，结合中国实际情况，研发和生产的高效免疫增强剂。本试验拟对参芪粉在提高母猪免疫方面的应用进行研究，包括检测：母猪初乳免疫球蛋白G（immunoglobulin G，IgG）的含量、母猪断奶后返情复配的情况、仔猪初生重和断奶重及育成率。
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
关键字:母猪；免疫力；初乳；仔猪
目录
摘要 1
关键词 1
Abstract 1
Key words 1
引言 1
1 材料和方法 2
1.1材料 2
1.1.1试验药品和对照药品 2
1.1.2主要试剂 2
1.1.3主要仪器 2
1．2 母猪初乳免疫球蛋白IgG的变化 2
1.2.1 动物分组与处理 2
1.2.2 母猪初乳中IgG的提取 2
1.2.3 母猪初乳中IgG的纯化 2
1.2.4 母猪初乳中IgG含量的测定 3
1.3对母猪断奶后返情复配的影响 3
1.3.1动物分组与处理 3
1.3.2母猪配种的一般步骤 3
1.4 对仔猪断奶重及育成率的影响 3
1.4.1动物分组与处理 3
1.4.2 乳猪、仔猪饲喂 3
2结果与分析 4
2.1 母猪初乳中IgG的变化结果 4
2.2 母猪断奶后返情复配的影响结果 5
2.3 仔猪断奶重及育成率的影响结果 5
3 讨论 6
致谢8
参考文献9
表14
表 2 5
表 3 5
图 1 4
参芪粉在提高母猪免疫方面的应用
引言
现在一般衡量母猪群繁殖性能最常用的指标是“断奶仔猪数/母猪/年”（PSY）。这个指标又是由“分娩 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
窝数/母猪/年”和“断奶仔猪数/窝”两个指标所决定。随着养猪业的发展，规模化养猪已大势所趋。疾病、品种、饲料是发展养猪生产面临的主要问题，其中最主要的是猪病的预防与控制。我国养猪疾病防治基础差，猪病种类繁多，疫苗、药物质量相对较差，未形成适合的养殖体系。建立与健全现代化中国养猪的疾病防疫防控模式，改变有病医病的不良循环，从服务生产的角度思考问题，整体提升猪群的抗病力、生产力与繁殖力，才能从根本上解决问题。这一切的核心是母猪，而母猪的免疫是影响母猪生产与生长性能的重要因素。就目前中国养猪业现状来看，用什么药物来提高母猪免疫，从而达到改善母猪生产性能、提升效果又如何是一个具有实际意义的研究方向。本实验通过用参芪粉和奥奇素两种药物饲喂母猪，通过对比检测参芪粉在提高母猪免疫方面影响，包括：母猪初乳中 IgG 的变化、母猪断奶后返情复配的影响、仔猪初生重和断奶重及育成率的影响。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 试验药品和对照药品 试验药品 参芪粉，由无锡正大畜禽有限公司研制提供。
对照药品 奥奇素，市售，美国奥特奇公司生产。
1.1.2 主要试剂 氯化钠，正辛酸，氢氧化钠，三氯醋酸，盐酸，Tris-HCL，无水乙酸，醋酸，考马斯亮蓝，甘油，甘氯酸，溴酚蓝，过硫酸铵，乙酸钡，SDS，DEAE-52，疏基乙醇。
1.1.3 主要仪器 电泳仪，紫外可见分光光度计，数显恒温水浴锅，真空干燥箱，电子精密天平，自动液相色谱层析仪，低速大容量离心机，酸度计，层析柱，电热恒温古风干燥箱。
母猪发情鉴定仪，大吨位电子称。
1.2 母猪初乳中IgG的含量
1.2.1 动物分组与处理 选取猪场 2 0 头同一日龄配种的经产母猪，尽量保证经产胎次一致，试验组母猪在产前 3 0 d 开始在母猪饲料中添加参芪粉（产前型）200 g/t ，产后整个哺乳期添加参芪粉200 g/t ；对照组母猪产前 30 天至整个哺乳期在母猪料中已加奥奇素1 kg/t 。两组分别于产后检测 72 h 时每头母猪初乳中的免疫球蛋白（IgG）。
1.2.2 母猪初乳中IgG 的提取——正辛酸法 挤奶前颈部肌注 OXT ( 催产素 )，采集奶样，准确量取初乳40 ml于500 ml烧杯中，加入60 mmol/L pH4.0醋酸缓冲液160 ml，用氢氧化钠溶液调到pH 4.5。
每毫升稀释液加入25 μl正辛酸，在磁力搅拌条件下缓慢加入正辛酸，室温搅拌30min。在4℃，5000 r/min 离心30min，弃去沉淀。
上清液4℃ 预冷，每1ml上清液加0.227 g硫酸铵，缓慢加入硫酸铵粉末，边加边搅拌，室温下继续搅拌30 min，5000 r/min离心15 min。
将沉淀溶于20ml生理盐水中，透析过滤，离心去沉淀，上清液即为粗提IgG。
1.2.3 母猪初乳中IgG 的纯化 将上述IgG 粗品溶于少量生理盐水后装入透析袋，悬于装有0.01 ml/L，pH 7.4的PBS大烧杯中，于磁力搅拌器上4℃透析24 h，每6 h换一次液。
取2g预处理的DEAE-52纤维素，装成1.5乘以30 cm，柱床高25 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
cm层析柱。准备缓冲液A（25 mmol/L Tris-HCL，35 mmol/L NaCl，pH8.8）平衡。取2 ml上述层析去盐母液进层析柱，上样后先用缓冲液A平衡，至流出液在280 nm波长洗脱曲线变得平直为止。以等量缓冲液A和缓冲液C（25 mmol/L Tris-HCL，500 mmol/L NaCl，pH 8.8 ）连续梯度洗脱，控制流速1ml/min。上样15 min后分步收集并记录波峰，2 ml/管，合并同一波峰收集管，再用PBS溶液透析，并进行分析鉴定。
1.2.4 母猪初乳中IgG 含量的测定——Folin-酚法 配制标准牛血清蛋白进行Folin-酚法实验，用分光光度计测定梯度浓度标准蛋白的OD280.以蛋白质的浓度为横坐标，OD280值为纵坐标，绘制标准曲线。各粗提 IgG 样品液定容至100 ml，按Folin-酚法操作，通过标准曲线计算样品的蛋白质浓度。
1.3 对母猪断奶后返情复配的影响
1.3.1 动物分组与处理 随机分层抽样选取200头近期分娩的经产母猪，均匀分布在各胎次，平均分为两组。试验组组在平时喂养饲料中添加参芪粉 200 g/t ，对照组在母猪饲料中添加奥奇素 1 kg/t 。分别记录每组母猪断奶后发情间隔和母猪断奶后第一情期发情配种率，并考察母猪发情状态。每日早7点、11点、下午3点、7点，观察分析记录并确定母猪是否发情，对发情母猪进行登记，并按程序辅助进行人工受精。
1.3.2 母猪配种一般步骤 公猪采精：将采精日公猪赶到采精室，先让其嗅、拱母猪台，用手抚摸公猪的阴部和腹部，当公猪性欲被刺激达到旺盛时，公猪主动伸出阴茎龟头来回抽动。用拇指和食指抓住螺旋体部分，其余三指予以配合，进行类似挤奶的律动捏动。弃去前部分和中间较稀的精清部分，采集精子后，1:10 进行稀释，加入精子活力剂。精子分装在 37℃ 保存，保存过程中应该使精子充分稀释，每隔1h 摇动精子，尽量不要长期储存。
[2] 高云航，李秀云，玄乃权，等.猪乳中抗猪瘟IgA、IgG、IgM抗体动态变化规律研究.中国预防兽医学报,2007,29(8):611-614.
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