秀丽新杆线虫ncRNANK的特性分析

秀丽新杆线虫ncRNANK的特性分析[20200507184447]
摘要:为了研究秀丽新杆线虫D型运动神经元(Dmns)中的一段非编码RNA(ncRNA-NK)及其与转录因子UNC-30和microRNA-AK之间的相互作用,本文以模式生物秀丽新杆线虫为研究对象,利用野生型(N2)、microRNA-AK基因过表达型(AK O/E)和microRNA-AK基因缺失型(AK deletion)虫株为实验材料,采用RT-PCR,PCR,Real-time PCR,3’RACE,5’RACE等实验技术,得到了ncRNA-NK 3’ 端全长序列。研究结果表明ncRNA-NK可能与microRNA-AK结合,从而降低microRNA-AK对UNC-30的抑制作用,使得3者在一定程度上达到平衡。
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关键字:秀丽新杆线虫;ncRNA-NK;microRNA-AK;UNC-30
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1 材料与方法2
1.1 材料 2
1.1.1 实验材料2
1.1.2 实验试剂2
1.1.3 实验设备 2
1.1.4 溶液配制 3
1.2 线虫的培养3
1.3 提线虫RNA3
1.3.1 线虫总RNA的提取3
1.3.2 RNA的纯化3
1.4 反转录3
1.5 PCR4
1.6 RACE技术4
1.6.1 3’RACE4
1.6.2 5’RACE5
1.7 real-time PCR5
1.7.1 AK O/E型线虫Real-time PCR 5
1.7.2 AK deletion线虫Real-time PCR 5
2 结果与分析5
2.1 PCR扩增结果5
2.2 3’RACE结果6
2.2.1 PCR检测结果6
2.2.2 测序结果6
2.3 5’RACE结果7
2.3.1 PCR检测结果7
2.3.2 测序结果7
2.4 Real-time PCR结果7
2.4.1 AK O/E型线虫Real-time PCR结果7
2.4.2 AK deletion品系线虫Real-time PCR结果8
3 讨论8
致谢9
参考文献 9秀丽新杆线虫ncRNA-NK的特性分析
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