日粮添加一水肌酸对长途运输肉仔鸡肌肉抗氧化性能和相关基因表达的影响
本试验旨在研究日粮中添加一水肌酸（CMH）对经过长途运输的肉仔鸡肌肉脂质氧化、抗氧化能力以及禽解偶联蛋白（avUCP）、禽过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子（avPGC-1α）和热休克蛋白（HSP70）表达量的影响。试验中选取320只28日龄健康AA肉仔鸡公雏，随机分配到3个日粮处理组中，分别采食基础日粮（160只）、及添加600mg/kg（80只）和1200mg/kg（80只）一水肌酸（CMH）的基础日粮，饲养期为14天。提前8h禁食后，在第42天的清晨，将未采食CMH组肉仔鸡平均分成2组，所有4组肉仔鸡按下述方案进行运输试验（1）对照组，未采食CMH并运输0.75 h（作为受较低应激刺激的对照组）；（2）长途运输组，未采食CMH并运输3 h；（3）CMH600组，采食600 mg/kg并运输3 h；（4）CMH1200组，采食1200 mg/kg并运输3 h。每组8重复，每重复10只鸡。结果显示经过3h的运输肉仔鸡胸大肌（PM）和胫骨前肌（TA）中硫代巴比妥反应物浓度以及T-SOD和GSH-Px的活性均显著提高（P＜0.05）。此外，3h运输还可显著提高PM和TA中avUCP、HSP70以及TA中avPGC-1α的mRNA表达量（P＜0.05）。与本研究假设不同，日粮中添加600或1200 mg/kg CMH对肌肉脂质氧化和上述基因表达无显著影响（P＞0.05）。结果表明，日粮中添加CMH并不能增强自由基清除能力和提高肌肉的抗氧化性能。据此我们推测，前人研究发现的CHM对运输应激肉仔鸡宰后肉质的改善可能是通过调控机体的其他代谢途径实现的。
目录
摘要 3
关键词 3
Abstract： 3
Key words: 4
引言 4
1 材料与方法 4
1.1 试验材料 4
1.2 试验设计 4
1.2.1 饲养管理及分组 4
1.2.2 运输方案 5
1.2.3 样本采集 6
1.3 检测指标 6
1.3.1 脂质过氧化指标 6
1.3.2 肌肉中相关基因的表达量 6
1.4 统计方法 8
2 结果与分析 8 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: @351916072@
2.1 CMH对长途运输肉仔鸡肌肉中丙二醛（MDA）含量的影响 8
2.2 CMH对长途运输肉仔鸡肌肉抗氧化酶活性的影响 9
2.3 CMH对长途运输肉仔鸡肌肉avUCP、avPGC1α和HSP70 mRNA表达量的影响 9
3 讨论 10
3.1 日粮中添加CMH对经过运输应激肉仔鸡肌肉脂质过氧化指标的影响 10
3.2 日粮中添加CMH对经过运输应激肉仔鸡肌肉抗氧化酶活性的影响 10
3.3 日粮中添加CMH对经过运输应激肉仔鸡肌肉avUCP、avPGC1α和HSP70 mRNA表达量的影响 11
4 结论 11
致谢 11
参考文献 12
日粮添加一水肌酸对长途运输肉仔鸡肌肉抗氧化性能和相关基因表达的影响
引言
引言
宰前运输是家禽生产过程中的必要环节之一，但运输过程中往往会引起家禽的应激反应[1]，应激程度主要取决于运输过程的温度及运输时间[2,3]。许多研究报道肉仔鸡夏季持续长时间的运输会对动物福利、生产效益和肉品品质方面造成不利的影响[4,5]，因此，夏季家禽的运输问题在世界肉禽加工领域受到越来越多的关注。目前，有研究者和生产者在积极探索有效方法以减轻运输对肉仔鸡造成的应激反应，以提高宰后的肉品品质。有研究表明，日粮中添加抗坏血酸、铬或一水肌酸等添加剂对减轻肉仔鸡运输应激反应有积极的作用[6,7]。
肌酸（Creatine，Cr），又称甲基胍乙酸，是天然存在于动物肌肉等组织中用于合成储能物质磷酸肌酸（CrP）的重要原料，在能量代谢方面，磷酸肌酸可以使ADP磷酸化而再生ATP，所以在剧烈的生理活动或者厌氧环境下发挥着重要作用[8]。肌酸的主要添加形式是其一水化合物。一水肌酸（CMH）因其在机体活动中有潜在的能量调节作用而受到广泛研究[9]。本研究室前期研究发现，从宰前14天开始，在基础日粮中添加1200 mg/kg CMH会显著降低夏季3h运输肉仔鸡胸大肌的滴水损失、乳酸含量以及糖酵解能力，有助于维持宰后胸肉的品质[7]。前人研究证实，持续长时间的运输会增加活性氧（ROS）的产生以及硫代巴比妥酸反应物（TBARS）的浓度，会增强脂质的过氧化反应[11]，除此之外还会改变家禽鸡肉中禽解偶联蛋白（avUCP）、禽过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子（avPGC1α）和热休克蛋白（HSP70）的表达量[11]。有意思的是，有报道指出肌酸可以通过清除超氧化物阴离子以及其他水性自由基来缓解机体的急性应激反应[10]。然而，日粮中添加CMH对运输应激肉仔鸡肉品品质的保护作用是否与它的抗氧化活性有关尚不清楚。因此，本研究旨在探讨宰前2周日粮中添加CMH对运输应激肉仔鸡肌肉脂质过氧化、抗氧化活性以及avUCP、avPGC1和HSP70表达量的影响。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 试验动物
400只1日龄爱拔益加（Arbor Acres，AA）肉鸡雄雏，购自安徽和威农业开发股份有限公司，所有雏鸡均饲喂相同的日粮直到28日龄。
1.1.2 主要试剂
CMH：采购自天津天成制药有限公司，纯度为99%
1.2 试验设计
1.2.1 饲养管理及分组
从前期采食相同日粮的28日龄健康雄性AA肉仔鸡中按照体重及健康状况挑选320只，随机分配到3个日粮处理中，分别采食基础日粮（160只）及添加600 mg/kg（80只）和1200 mg/kg（80只）一水肌酸（CMH）的基础日粮，饲养期14 d。所有的鸡都用三层的铁丝笼笼养，保证养殖场所的环境可控。饲养管理按《AA 肉鸡饲养管理手册》进行，自由采食和饮水，粉料饲喂，采用玉米豆粕型日粮，日粮组成及营养水平见表1。
提前8h禁食后，在第42天清晨将采食未添加CMH基础日粮的肉仔鸡平均分为两组，每组80只。共四个处理组，每组8重复，每重复10只鸡。
表1 日粮组成及营养水平
Table 1 Ingredient composition and calculated nutrient levels of the basal diets
项目 Items
1~21 d
22~42 d
日粮组分 Ingredients （%）
玉米Corn
55.35
60.80
豆粕Soybean meal
32.28
23.92
玉米蛋白粉 Corn gluten meal
4.50
5.50
豆油Soybean oil
3.20
5.00
石粉Limestone
1.63
1.40
磷酸氢钙CaHPO4
1.20
1.00
赖氨酸 LLysine HCl
0.28
目录
摘要 3
关键词 3
Abstract： 3
Key words: 4
引言 4
1 材料与方法 4
1.1 试验材料 4
1.2 试验设计 4
1.2.1 饲养管理及分组 4
1.2.2 运输方案 5
1.2.3 样本采集 6
1.3 检测指标 6
1.3.1 脂质过氧化指标 6
1.3.2 肌肉中相关基因的表达量 6
1.4 统计方法 8
2 结果与分析 8 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: @351916072@
2.1 CMH对长途运输肉仔鸡肌肉中丙二醛（MDA）含量的影响 8
2.2 CMH对长途运输肉仔鸡肌肉抗氧化酶活性的影响 9
2.3 CMH对长途运输肉仔鸡肌肉avUCP、avPGC1α和HSP70 mRNA表达量的影响 9
3 讨论 10
3.1 日粮中添加CMH对经过运输应激肉仔鸡肌肉脂质过氧化指标的影响 10
3.2 日粮中添加CMH对经过运输应激肉仔鸡肌肉抗氧化酶活性的影响 10
3.3 日粮中添加CMH对经过运输应激肉仔鸡肌肉avUCP、avPGC1α和HSP70 mRNA表达量的影响 11
4 结论 11
致谢 11
参考文献 12
日粮添加一水肌酸对长途运输肉仔鸡肌肉抗氧化性能和相关基因表达的影响
引言
引言
宰前运输是家禽生产过程中的必要环节之一，但运输过程中往往会引起家禽的应激反应[1]，应激程度主要取决于运输过程的温度及运输时间[2,3]。许多研究报道肉仔鸡夏季持续长时间的运输会对动物福利、生产效益和肉品品质方面造成不利的影响[4,5]，因此，夏季家禽的运输问题在世界肉禽加工领域受到越来越多的关注。目前，有研究者和生产者在积极探索有效方法以减轻运输对肉仔鸡造成的应激反应，以提高宰后的肉品品质。有研究表明，日粮中添加抗坏血酸、铬或一水肌酸等添加剂对减轻肉仔鸡运输应激反应有积极的作用[6,7]。
肌酸（Creatine，Cr），又称甲基胍乙酸，是天然存在于动物肌肉等组织中用于合成储能物质磷酸肌酸（CrP）的重要原料，在能量代谢方面，磷酸肌酸可以使ADP磷酸化而再生ATP，所以在剧烈的生理活动或者厌氧环境下发挥着重要作用[8]。肌酸的主要添加形式是其一水化合物。一水肌酸（CMH）因其在机体活动中有潜在的能量调节作用而受到广泛研究[9]。本研究室前期研究发现，从宰前14天开始，在基础日粮中添加1200 mg/kg CMH会显著降低夏季3h运输肉仔鸡胸大肌的滴水损失、乳酸含量以及糖酵解能力，有助于维持宰后胸肉的品质[7]。前人研究证实，持续长时间的运输会增加活性氧（ROS）的产生以及硫代巴比妥酸反应物（TBARS）的浓度，会增强脂质的过氧化反应[11]，除此之外还会改变家禽鸡肉中禽解偶联蛋白（avUCP）、禽过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子（avPGC1α）和热休克蛋白（HSP70）的表达量[11]。有意思的是，有报道指出肌酸可以通过清除超氧化物阴离子以及其他水性自由基来缓解机体的急性应激反应[10]。然而，日粮中添加CMH对运输应激肉仔鸡肉品品质的保护作用是否与它的抗氧化活性有关尚不清楚。因此，本研究旨在探讨宰前2周日粮中添加CMH对运输应激肉仔鸡肌肉脂质过氧化、抗氧化活性以及avUCP、avPGC1和HSP70表达量的影响。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 试验动物
400只1日龄爱拔益加（Arbor Acres，AA）肉鸡雄雏，购自安徽和威农业开发股份有限公司，所有雏鸡均饲喂相同的日粮直到28日龄。
1.1.2 主要试剂
CMH：采购自天津天成制药有限公司，纯度为99%
1.2 试验设计
1.2.1 饲养管理及分组
从前期采食相同日粮的28日龄健康雄性AA肉仔鸡中按照体重及健康状况挑选320只，随机分配到3个日粮处理中，分别采食基础日粮（160只）及添加600 mg/kg（80只）和1200 mg/kg（80只）一水肌酸（CMH）的基础日粮，饲养期14 d。所有的鸡都用三层的铁丝笼笼养，保证养殖场所的环境可控。饲养管理按《AA 肉鸡饲养管理手册》进行，自由采食和饮水，粉料饲喂，采用玉米豆粕型日粮，日粮组成及营养水平见表1。
提前8h禁食后，在第42天清晨将采食未添加CMH基础日粮的肉仔鸡平均分为两组，每组80只。共四个处理组，每组8重复，每重复10只鸡。
表1 日粮组成及营养水平
Table 1 Ingredient composition and calculated nutrient levels of the basal diets
项目 Items
1~21 d
22~42 d
日粮组分 Ingredients （%）
玉米Corn
55.35
60.80
豆粕Soybean meal
32.28
23.92
玉米蛋白粉 Corn gluten meal
4.50
5.50
豆油Soybean oil
3.20
5.00
石粉Limestone
1.63
1.40
磷酸氢钙CaHPO4
1.20
1.00
赖氨酸 LLysine HCl
0.28
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