枸杞多糖的提取及体外抗氧化活性的测定
摘 要本文就枸杞提取物中的多糖为研究对象，选用超声波提取法提取枸杞多糖，用硫酸-苯酚法对多糖含量进行定性定量分析；对枸杞多糖对自由基的清除率进行测定，并与同浓度条件下的VC的抗氧化活性进行比较；测定枸杞多糖对光照、氧化剂、还原剂的稳定性。结果表明：用超声波法提取的多糖含量为18.7%；枸杞多糖具有一定的体外抗氧化活性作用，但低于VC的体外抗氧化活性；枸杞多糖的稳定性受光照影响较小，耐氧化性较好，且不易被还原，说明枸杞多糖是一种稳定性较高的活性物质。目 录
1 绪论
1.1 枸杞概述 1
1.1.1 枸杞植物简介 1
1.1.2 枸杞功效及药理作用 1
1.2 多糖的概述 1
1.3 枸杞多糖的生物活性作用 3
1.3.1 免疫调节 3
1.3.2 抗肿瘤 3
1.3.3 抗氧化、抗衰老 3
1.3.4 降血糖、降血脂 4
1.3.5 修复神经 4
1.3.6 预防心血管疾病 4
1.3.7 提高骨基因表达、骨质密度、骨矿含量 4
1.3.8 保肝 5
1.4 多糖的提取、测定及活性研究 5
1.4.1 多糖的提取 5
1.4.2 多糖的测定 5
1.4.3 多糖对自由基的清除率 6
1.5 枸杞多糖的研究现状及发展趋势 6
1.6 研究本课题的目的和意义 7
2 实验内容
2.1 实验材料 8
2.2 实验方法 8
2.2.1 枸杞预处理 8
2.2.2 标准曲线的绘制 8
2.2.3 枸杞多糖的提取 8
2.2.4 枸杞多糖体外抗氧化活性的测定 9
2.2.5 枸杞多糖的稳定性实验 10
2.3 结果与分析 10
2.3.1 标准曲线 10
2.3.2 多糖含量的计算 11
2.3.3 枸杞多糖对DPPH自由基的清除作用 11
2.3.
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^3^5^1^9^1^6^0^7^2^*
8
2.2.3 枸杞多糖的提取 8
2.2.4 枸杞多糖体外抗氧化活性的测定 9
2.2.5 枸杞多糖的稳定性实验 10
2.3 结果与分析 10
2.3.1 标准曲线 10
2.3.2 多糖含量的计算 11
2.3.3 枸杞多糖对DPPH自由基的清除作用 11
2.3.4 枸杞多糖稳定性 12
结论 14
参考文献 15
致谢 17
1 绪论
1.1 枸杞概述
1.1.1 枸杞植物简介
果实枸杞为茄科植物宁夏枸杞的干燥成熟果实。灌木或小乔木状，主枝数条，粗壮，果枝细长，先端通常弯曲下垂，外皮淡灰黄色，刺状枝细而短，生于叶腋，长14cm。呈类纺锤形或椭圆形，长620cm，直径310mm。表面红色或暗红色，顶端有小凸起状的花柱痕，基部有白色的果梗痕。果皮柔韧，皱缩；果肉肉质，柔润。种子2050粒，类肾形，扁而翘，长1.51.9mm，宽11.7mm，表面浅黄色或棕黄色。气微，味甜，嚼之唾液呈红黄色，以粒大、肉厚、籽小、色红、质柔、味甜者为佳。
1.1.2 枸杞功效及药理作用
枸杞是历史悠久、药食同源、驰名中外名贵的中药材。早在《神农本草经》中就被列为“久服，轻身不老，耐寒暑”的上品，枸杞味甘、性平、微苦、无毒。枸杞的果、叶、苗、根都可入药，皆有滋补作用。果实具有滋补肝肾、益精明目、强健筋骨的功效，可用于虚劳精亏，腰膝酸软，眩晕耳鸣，内热消渴，血虚萎黄，目昏不明；叶以止渴、消烦、解毒见长；皮(地骨皮)有清热、凉血、降压的功效。
随着枸杞药理研究的深入进行，新的药理作用不断被发现。现代药理研究表明，枸杞子制剂可以治疗慢性肝炎，高脂血症，脑动脉硬化，阿尔茨海默病轻度认知障碍。也有研究表明枸杞子口服3个月，对糖尿病视网膜病变患者有一定的疗效。同时枸杞有免疫调节、抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、抗疲劳、降血脂、降血糖、降血压、补肾、保肝、明目、养颜、健脑、排毒、保护生殖系统、抗辐射损伤十六项功能[1]。同时它还可提高血睾酮水平，起超强壮作用；对造血功能有促进作用；对正常健康人也有显著升高白细胞的作用。
1.2 多糖的概述
糖是多羟基醛或多羟基酮及其衍生物、聚合物的总称。糖的分子中含有碳、氢、氧三种元素，大多数糖分子中氢和氧的比例是2:1，因此，具有Cx(H2O)y的通式。在自然界中，糖的分布极广，无论是在植物界还是动物界都有他们的存在。由于糖是构成生物机体的的重要基础物质之一，所以在所有的生物体中均含有糖及其衍生物。在生物体中，糖是植物细胞与组织的重要营养物质与支持物质。动物通过摄入糖类物质，提供生理活动及其他运动所需要的能量。糖及其衍生物是中药的重要生物活性物质之一，如香菇多糖具有抗肿瘤活性，黄芪多糖具有增强免疫功能的作用。由糖衍生的各种苷类化合物常为中药的有效成分。
糖类物质可根据其能否被水解和分子量大小分为单糖、低聚糖和多糖。多糖是由糖苷键结合而成的糖链，是由10个以上的单糖组而成的聚合糖高分子碳水化合物，可用通式（C6H10O5）n 表示。由相同的单糖组成的多糖称为多糖，如淀粉、纤维素和糖原；以没的单糖组成的多糖称为杂多糖，如阿拉伯胶是由戊糖和半乳糖等组成。多糖不是一种纯粹的化学物质，而是聚合程度不同的物质混合物，分子量较大。多糖基本没有单糖的性质，一般不溶于水，无甜味，不能形成结晶，无还原性和变旋现象，多糖也是糖苷，可以水解，在水解过程中，往往会产生一系列的中间产物，最终完全水解得到单糖。
多糖存在于物质的醛糖和酮糖通过糖苷键连接在一起的活性多聚物，广泛存在于植物和微生物的细胞壁、动物细胞膜中，是构成生命的三大基础物质之一，有多种生物活性。在早期的多糖研究中，它作为水系统的粘稠剂、悬浮剂、稳定剂发展起来的，作为药物有报道，在很长的一段时间没有得到足够的重视。近年来由于新药资源的开发和免疫物质的研究发现多糖具有多方面、复杂的生物活性引起药理学家、生物学家的极大兴趣。
近二十年来，由于分子生物学的发展，人们逐渐认识到糖及其复合物分子具有极其重要的生物功能，多糖与免疫功能的调节、细胞与细胞的识别、细胞间物质的运输、癌症的诊断与治疗等，都有着密切的关系。多糖在医药上还是一种很好的佐剂。近年来又发现多糖的糖链在分子生物学中具有决定性作用[2]。此外，它还能控制细胞的分裂和分化、调节细胞的生长和衰老。多糖在食品工业、发酵工业及石油工业上也有着广泛的应用。因此，在开展多糖资源的开发、多糖结构的分析、多糖药理作用等的研究方面，人们做了大量的工作。目前，多糖的研究以日本、美国、德国、俄罗斯等国处于领先地位。
多糖根据来源可分为植物多糖、动物多糖、真菌多糖、细菌多糖、藻类多糖，在已经分离的多糖中植物多糖占大多数，存在于植物的根、茎、叶、花、果实、种子中。广泛存在于植物、微生物（细菌和真菌）和海藻中。其中研究的较早且最多的是从细菌中得到的各种荚膜多糖，它在医药上主要用于疫苗[3] 。1984年，苏联人在荷兰召开的第十二次国际碳水化合物谈论会上报道了用全合成特定结构的荚膜多糖作疫苗。引起会
1 绪论
1.1 枸杞概述 1
1.1.1 枸杞植物简介 1
1.1.2 枸杞功效及药理作用 1
1.2 多糖的概述 1
1.3 枸杞多糖的生物活性作用 3
1.3.1 免疫调节 3
1.3.2 抗肿瘤 3
1.3.3 抗氧化、抗衰老 3
1.3.4 降血糖、降血脂 4
1.3.5 修复神经 4
1.3.6 预防心血管疾病 4
1.3.7 提高骨基因表达、骨质密度、骨矿含量 4
1.3.8 保肝 5
1.4 多糖的提取、测定及活性研究 5
1.4.1 多糖的提取 5
1.4.2 多糖的测定 5
1.4.3 多糖对自由基的清除率 6
1.5 枸杞多糖的研究现状及发展趋势 6
1.6 研究本课题的目的和意义 7
2 实验内容
2.1 实验材料 8
2.2 实验方法 8
2.2.1 枸杞预处理 8
2.2.2 标准曲线的绘制 8
2.2.3 枸杞多糖的提取 8
2.2.4 枸杞多糖体外抗氧化活性的测定 9
2.2.5 枸杞多糖的稳定性实验 10
2.3 结果与分析 10
2.3.1 标准曲线 10
2.3.2 多糖含量的计算 11
2.3.3 枸杞多糖对DPPH自由基的清除作用 11
2.3.
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^3^5^1^9^1^6^0^7^2^*
8
2.2.3 枸杞多糖的提取 8
2.2.4 枸杞多糖体外抗氧化活性的测定 9
2.2.5 枸杞多糖的稳定性实验 10
2.3 结果与分析 10
2.3.1 标准曲线 10
2.3.2 多糖含量的计算 11
2.3.3 枸杞多糖对DPPH自由基的清除作用 11
2.3.4 枸杞多糖稳定性 12
结论 14
参考文献 15
致谢 17
1 绪论
1.1 枸杞概述
1.1.1 枸杞植物简介
果实枸杞为茄科植物宁夏枸杞的干燥成熟果实。灌木或小乔木状，主枝数条，粗壮，果枝细长，先端通常弯曲下垂，外皮淡灰黄色，刺状枝细而短，生于叶腋，长14cm。呈类纺锤形或椭圆形，长620cm，直径310mm。表面红色或暗红色，顶端有小凸起状的花柱痕，基部有白色的果梗痕。果皮柔韧，皱缩；果肉肉质，柔润。种子2050粒，类肾形，扁而翘，长1.51.9mm，宽11.7mm，表面浅黄色或棕黄色。气微，味甜，嚼之唾液呈红黄色，以粒大、肉厚、籽小、色红、质柔、味甜者为佳。
1.1.2 枸杞功效及药理作用
枸杞是历史悠久、药食同源、驰名中外名贵的中药材。早在《神农本草经》中就被列为“久服，轻身不老，耐寒暑”的上品，枸杞味甘、性平、微苦、无毒。枸杞的果、叶、苗、根都可入药，皆有滋补作用。果实具有滋补肝肾、益精明目、强健筋骨的功效，可用于虚劳精亏，腰膝酸软，眩晕耳鸣，内热消渴，血虚萎黄，目昏不明；叶以止渴、消烦、解毒见长；皮(地骨皮)有清热、凉血、降压的功效。
随着枸杞药理研究的深入进行，新的药理作用不断被发现。现代药理研究表明，枸杞子制剂可以治疗慢性肝炎，高脂血症，脑动脉硬化，阿尔茨海默病轻度认知障碍。也有研究表明枸杞子口服3个月，对糖尿病视网膜病变患者有一定的疗效。同时枸杞有免疫调节、抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、抗疲劳、降血脂、降血糖、降血压、补肾、保肝、明目、养颜、健脑、排毒、保护生殖系统、抗辐射损伤十六项功能[1]。同时它还可提高血睾酮水平，起超强壮作用；对造血功能有促进作用；对正常健康人也有显著升高白细胞的作用。
1.2 多糖的概述
糖是多羟基醛或多羟基酮及其衍生物、聚合物的总称。糖的分子中含有碳、氢、氧三种元素，大多数糖分子中氢和氧的比例是2:1，因此，具有Cx(H2O)y的通式。在自然界中，糖的分布极广，无论是在植物界还是动物界都有他们的存在。由于糖是构成生物机体的的重要基础物质之一，所以在所有的生物体中均含有糖及其衍生物。在生物体中，糖是植物细胞与组织的重要营养物质与支持物质。动物通过摄入糖类物质，提供生理活动及其他运动所需要的能量。糖及其衍生物是中药的重要生物活性物质之一，如香菇多糖具有抗肿瘤活性，黄芪多糖具有增强免疫功能的作用。由糖衍生的各种苷类化合物常为中药的有效成分。
糖类物质可根据其能否被水解和分子量大小分为单糖、低聚糖和多糖。多糖是由糖苷键结合而成的糖链，是由10个以上的单糖组而成的聚合糖高分子碳水化合物，可用通式（C6H10O5）n 表示。由相同的单糖组成的多糖称为多糖，如淀粉、纤维素和糖原；以没的单糖组成的多糖称为杂多糖，如阿拉伯胶是由戊糖和半乳糖等组成。多糖不是一种纯粹的化学物质，而是聚合程度不同的物质混合物，分子量较大。多糖基本没有单糖的性质，一般不溶于水，无甜味，不能形成结晶，无还原性和变旋现象，多糖也是糖苷，可以水解，在水解过程中，往往会产生一系列的中间产物，最终完全水解得到单糖。
多糖存在于物质的醛糖和酮糖通过糖苷键连接在一起的活性多聚物，广泛存在于植物和微生物的细胞壁、动物细胞膜中，是构成生命的三大基础物质之一，有多种生物活性。在早期的多糖研究中，它作为水系统的粘稠剂、悬浮剂、稳定剂发展起来的，作为药物有报道，在很长的一段时间没有得到足够的重视。近年来由于新药资源的开发和免疫物质的研究发现多糖具有多方面、复杂的生物活性引起药理学家、生物学家的极大兴趣。
近二十年来，由于分子生物学的发展，人们逐渐认识到糖及其复合物分子具有极其重要的生物功能，多糖与免疫功能的调节、细胞与细胞的识别、细胞间物质的运输、癌症的诊断与治疗等，都有着密切的关系。多糖在医药上还是一种很好的佐剂。近年来又发现多糖的糖链在分子生物学中具有决定性作用[2]。此外，它还能控制细胞的分裂和分化、调节细胞的生长和衰老。多糖在食品工业、发酵工业及石油工业上也有着广泛的应用。因此，在开展多糖资源的开发、多糖结构的分析、多糖药理作用等的研究方面，人们做了大量的工作。目前，多糖的研究以日本、美国、德国、俄罗斯等国处于领先地位。
多糖根据来源可分为植物多糖、动物多糖、真菌多糖、细菌多糖、藻类多糖，在已经分离的多糖中植物多糖占大多数，存在于植物的根、茎、叶、花、果实、种子中。广泛存在于植物、微生物（细菌和真菌）和海藻中。其中研究的较早且最多的是从细菌中得到的各种荚膜多糖，它在医药上主要用于疫苗[3] 。1984年，苏联人在荷兰召开的第十二次国际碳水化合物谈论会上报道了用全合成特定结构的荚膜多糖作疫苗。引起会
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