利用crisprcas9技术构建棉铃虫ugt41b3和ugt40d1基因敲除品系

棉铃虫的寄主范围广，其幼虫具备较强的解毒代谢能力，能够降解多种植物的防御性次生物质。其中，棉铃虫可以利用与UGT41B3和UGT40D1基因产物相关的UDP-糖基转移酶（UGT）使棉花次生物质棉酚糖基化，进而进行代谢。CRISPR/Cas9 系统是最近被发现并发展的一种强有力的基因编辑工具，该系统能够在特定的基因位点引起基因组双链DNA断裂，进而利用生物的非同源末端连接和同源重组修复达到基因编辑的目的。本研究通过CRISPR/Cas9技术敲除UGT41B3和UGT40D1基因，筛选获得基因敲除纯合突变体，构建UGT41B3和UGT40D1基因敲除品系，为更好揭示这两个基因在棉铃虫对棉酚和杀虫剂解毒代谢中的作用以及明确其基因功能提供了基础。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言（或绪论）1
1材料与方法2
1.1实验材料 2
1.1.1供试昆虫2
1.1.2主要仪器和试剂2
1.2实验方法 2
1.2.1 sgRNA设计2
1.2.2胚胎期显微注射5
1.2.3 UGT41B3和UGT40D1基因敲除基因型检测5
1.2.4 构建UGT41B3基因敲除品系5
1.2.5 构建UGT40D1基因敲除品系6
2 结果与分析6
2.1 UGT41B3基因的基因编辑效率6
2.2 UGT41B3的基因编辑突变类型6
2.3 UGT41B3基因突变遗传到下一代的效率7
2.4 UGT41B3基因敲除品系的构建7
2.5 UGT40D3基因敲除品系的构建7
3讨论8
致谢9
参考文献10
图14
图26
图37
图48
表17
利用CRISPR/Cas9技术构建棉铃虫UGT41B3和UGT40D1基因敲除品系

版权保护: 本文由 hbsrm.com编辑，转载请保留链接: www.hbsrm.com/nongxue/zwbh/225.html