早期补饲代乳料对断奶前后仔猪粪便中菌群数量及其代谢产物的影响
本试验旨在探究早期补饲代乳料对断奶前后仔猪粪便中菌群数量及其代谢产物浓度的影响。选取10窝杜洛克×长白×大白的三元杂交仔猪,随机分为两组(对照组和试验组),每组5窝,每窝8头仔猪。对照组即纯母乳喂养;试验组即在4日龄开始对初生仔猪进行补饲喂养至28日龄(即饲喂母乳的同时添加商业代乳料)。取28日龄和35日龄仔猪的粪便,测定断奶前后仔猪粪便中主要菌群的数量及短链脂肪酸浓度。结果表明,在断奶前(28日龄),与对照组相比,试验组仔猪粪便中乙酸、丁酸、异丁酸、异戊酸的浓度有降低的趋势(P = 0.05;P = 0.06;P = 0.05;P = 0.09),而乙酸占总酸、丙酸占总酸的比例显著升高(P < 0.05),丁酸占总酸、戊酸占总酸的比例显著降低(P < 0.05)。在断奶前(28日龄),与对照组相比,试验组仔猪粪便中厚壁菌门的基因拷贝数显著升高(P < 0.05)。在断奶后(35日龄),与对照组相比,试验组仔猪粪便中各短链脂肪酸(SCFAs)的浓度及其占总酸的比例均无显著差异(P > 0.05)。在断奶后(35日龄),与对照组相比,试验组仔猪粪便中梭菌IV群的基因拷贝数显著升高(P < 0.05),大肠杆菌属的基因拷贝数显著降低(P < 0.05)。结果提示早期补饲代乳料改变了断奶前后仔猪粪便中菌群的基因拷贝数和短链脂肪酸的浓度及组成。
目录
摘要 2
关键词 2
Abstract 2
Key words 2
引言 3
1 材料与方法 3
1.1 试验材料、试剂、仪器 4
1.1.1 试验材料 4
1.1.2 试验试剂 4
1.1.3 试验仪器 4
1.2 试验方法 4
1.2.1 试验设计 4
1.2.2 组织样品的采集 4
1.2.3 粪便中菌群DNA的提取 4
1.2.4 粪便中短链脂肪酸(SCFA)浓度的测定 5
1.2.5 粪便中菌群荧光定量PCR(RTPCR) 5
1.2.6 数据统计分析 5
2. 结果与分析 6
2.1 早期补饲代乳料对断奶前后仔猪粪便中短链脂肪酸浓度的影响 6 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: &351916072&
2.2 早期补饲代乳料对断奶前后仔猪粪便中菌群数量的影响 7
3.讨论 8
3.1 断奶前(28日龄)仔猪粪便中主要菌群数量和代谢产物................................8
3.2 断奶后(35日龄)仔猪粪便中主要菌群数量和代谢产物................................9
结论 9
致谢 9
参考文献 10
附录 11
早期补饲代乳料对断奶前后仔猪粪便中菌群数量及其代谢产物浓度的影响
引言
引言
随着现代集约化养猪业的快速发展,人们利于高产母猪增加其产仔数来获得更高的经济利益,目前我国每头母猪年均提供的仔猪达16.5头左右。但随着母猪产仔数增加,母猪的泌乳量难以满足所有新生仔猪的生长需求。调查显示,母乳是新生仔猪在哺乳期间获得营养的主要来源,含有丰富的营养及生物活性物质,母猪泌乳量不足会造成断奶仔猪腹泻率和死亡率上升[1]。而现代化养猪场一般会通过给仔猪补饲代乳料来缓解这个问题[23]。有研究报道表明,早期补饲代乳料能锻炼仔猪的消化系统,促进仔猪肠道发育,有助于仔猪适应断奶后的固体日粮[4]。目前人们对仔猪代乳料的研究主要关注小肠发育和消化吸收功能,但早期补饲代乳料对仔猪肠道微生物组成及其代谢产物的影响并不清楚。研究表明,仔猪肠道内栖息了大量的微生物,对仔猪肠道及机体健康至关重要[5,6]。
动物的胃肠道中栖息着约30个属、500多种细菌,主要由厌氧菌、兼性厌氧菌和需氧菌组成,形成了一个复杂多样的微生态物环境[7]。肠道内的优势菌群多为专性厌氧菌,约占总菌的99%,包括乳酸杆菌、梭菌XIVa等,与动物肠道发育以及免疫系统成熟密切相关。另外,肠道内还包含一些兼性厌氧菌,如大肠杆菌、链球菌等,不到总菌的1%,但与肠道内的优势菌群相互依存,共同维持机体健康。肠道菌群不仅构成了动物机体微生态系统,也参与机体对营养物质的消化吸收[8]、肠道免疫调节和免疫系统的发育[5,6]等生理过程,肠道菌群的种类和数量与动物机体的健康息息相关。调查显示,仔猪肠道菌群能分泌宿主不能分泌分解和消化纤维素的酶,消化日粮中难以消化的碳水化合物[9]。不仅如此,肠道菌群还能够刺激机体免疫系统成熟。研究显示,无菌动物的免疫系统包括淋巴系统和抗体形成系统等都发育不完全,乳酸杆菌能刺激无菌小鼠的淋巴细胞发育正常[10]。而当肠道菌群比例失衡时,会导致动物发生腹泻等肠道疾病,损害动物机体健康。
有研究表明,日粮是影响动物肠道微生物的建立和演变的最重要因素之一[7]。在仔猪断奶期间,饮食的改变会引起仔猪肠道菌群结构发生剧烈转变[11]。近年来,由于条件限制,粪便是人们研究动物肠道菌群的主要方式[12]。粪便是动物胃肠道最末端的排泄物,一定程度上能够反应仔猪肠道菌群定植和代谢状态[13]。因此,本试验在仔猪4日龄时对初生仔猪进行早期补饲代乳料(即仔猪母乳喂养的同时补饲商业代乳料),以纯母乳喂养作为对照,利用RTPCR的方法来测定仔猪粪便中主要菌群的基因拷贝数,用气相色谱法来测定仔猪粪便中的短链脂肪酸浓度,探究早期补饲代乳料对断奶前后仔猪粪便中菌群组成及其代谢产物的影响。
1. 材料与方法
1.1 试验材料、试剂、仪器
1.1.1 试验材料
研究对象为28日龄和35日龄仔猪的粪便,来源于大学消化道微生物试验室。试验材料包括1.5 mL离心管、2 mL离心管、枪头、水浴锅、电子秤、镐珠管等。
1.1.2 试验试剂
酚氯仿异戊醇、冰乙醇、偏磷酸溶液、巴豆酸、定量试剂盒、双蒸水等。
1.1.3 试验仪器
烘箱、离心机、定量PCR仪、超低温冰箱、气相色谱仪、高压灭菌锅、注射器、微量进样器等。
1.2 试验方法
1.2.1 试验设计
本试验在大学江浦农场试验基地进行。试验选取同一天出生且窝重相近的10窝杜×长×大仔猪,随机分为2组,每组5窝,每窝8头仔猪(1.87 ± 0.05 kg/头),分别为:纯母乳喂养组(对照组)和饲喂母乳的同时添加代乳料的混合喂养组(试验组)(n=5)。仔猪出生后第4天开始对试验组仔猪添加商业代乳料,直到仔猪28日龄断奶。断奶后,所有仔猪饲喂相同的日粮直到35日龄。
1.2.2 粪便采集
目录
摘要 2
关键词 2
Abstract 2
Key words 2
引言 3
1 材料与方法 3
1.1 试验材料、试剂、仪器 4
1.1.1 试验材料 4
1.1.2 试验试剂 4
1.1.3 试验仪器 4
1.2 试验方法 4
1.2.1 试验设计 4
1.2.2 组织样品的采集 4
1.2.3 粪便中菌群DNA的提取 4
1.2.4 粪便中短链脂肪酸(SCFA)浓度的测定 5
1.2.5 粪便中菌群荧光定量PCR(RTPCR) 5
1.2.6 数据统计分析 5
2. 结果与分析 6
2.1 早期补饲代乳料对断奶前后仔猪粪便中短链脂肪酸浓度的影响 6 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: &351916072&
2.2 早期补饲代乳料对断奶前后仔猪粪便中菌群数量的影响 7
3.讨论 8
3.1 断奶前(28日龄)仔猪粪便中主要菌群数量和代谢产物................................8
3.2 断奶后(35日龄)仔猪粪便中主要菌群数量和代谢产物................................9
结论 9
致谢 9
参考文献 10
附录 11
早期补饲代乳料对断奶前后仔猪粪便中菌群数量及其代谢产物浓度的影响
引言
引言
随着现代集约化养猪业的快速发展,人们利于高产母猪增加其产仔数来获得更高的经济利益,目前我国每头母猪年均提供的仔猪达16.5头左右。但随着母猪产仔数增加,母猪的泌乳量难以满足所有新生仔猪的生长需求。调查显示,母乳是新生仔猪在哺乳期间获得营养的主要来源,含有丰富的营养及生物活性物质,母猪泌乳量不足会造成断奶仔猪腹泻率和死亡率上升[1]。而现代化养猪场一般会通过给仔猪补饲代乳料来缓解这个问题[23]。有研究报道表明,早期补饲代乳料能锻炼仔猪的消化系统,促进仔猪肠道发育,有助于仔猪适应断奶后的固体日粮[4]。目前人们对仔猪代乳料的研究主要关注小肠发育和消化吸收功能,但早期补饲代乳料对仔猪肠道微生物组成及其代谢产物的影响并不清楚。研究表明,仔猪肠道内栖息了大量的微生物,对仔猪肠道及机体健康至关重要[5,6]。
动物的胃肠道中栖息着约30个属、500多种细菌,主要由厌氧菌、兼性厌氧菌和需氧菌组成,形成了一个复杂多样的微生态物环境[7]。肠道内的优势菌群多为专性厌氧菌,约占总菌的99%,包括乳酸杆菌、梭菌XIVa等,与动物肠道发育以及免疫系统成熟密切相关。另外,肠道内还包含一些兼性厌氧菌,如大肠杆菌、链球菌等,不到总菌的1%,但与肠道内的优势菌群相互依存,共同维持机体健康。肠道菌群不仅构成了动物机体微生态系统,也参与机体对营养物质的消化吸收[8]、肠道免疫调节和免疫系统的发育[5,6]等生理过程,肠道菌群的种类和数量与动物机体的健康息息相关。调查显示,仔猪肠道菌群能分泌宿主不能分泌分解和消化纤维素的酶,消化日粮中难以消化的碳水化合物[9]。不仅如此,肠道菌群还能够刺激机体免疫系统成熟。研究显示,无菌动物的免疫系统包括淋巴系统和抗体形成系统等都发育不完全,乳酸杆菌能刺激无菌小鼠的淋巴细胞发育正常[10]。而当肠道菌群比例失衡时,会导致动物发生腹泻等肠道疾病,损害动物机体健康。
有研究表明,日粮是影响动物肠道微生物的建立和演变的最重要因素之一[7]。在仔猪断奶期间,饮食的改变会引起仔猪肠道菌群结构发生剧烈转变[11]。近年来,由于条件限制,粪便是人们研究动物肠道菌群的主要方式[12]。粪便是动物胃肠道最末端的排泄物,一定程度上能够反应仔猪肠道菌群定植和代谢状态[13]。因此,本试验在仔猪4日龄时对初生仔猪进行早期补饲代乳料(即仔猪母乳喂养的同时补饲商业代乳料),以纯母乳喂养作为对照,利用RTPCR的方法来测定仔猪粪便中主要菌群的基因拷贝数,用气相色谱法来测定仔猪粪便中的短链脂肪酸浓度,探究早期补饲代乳料对断奶前后仔猪粪便中菌群组成及其代谢产物的影响。
1. 材料与方法
1.1 试验材料、试剂、仪器
1.1.1 试验材料
研究对象为28日龄和35日龄仔猪的粪便,来源于大学消化道微生物试验室。试验材料包括1.5 mL离心管、2 mL离心管、枪头、水浴锅、电子秤、镐珠管等。
1.1.2 试验试剂
酚氯仿异戊醇、冰乙醇、偏磷酸溶液、巴豆酸、定量试剂盒、双蒸水等。
1.1.3 试验仪器
烘箱、离心机、定量PCR仪、超低温冰箱、气相色谱仪、高压灭菌锅、注射器、微量进样器等。
1.2 试验方法
1.2.1 试验设计
本试验在大学江浦农场试验基地进行。试验选取同一天出生且窝重相近的10窝杜×长×大仔猪,随机分为2组,每组5窝,每窝8头仔猪(1.87 ± 0.05 kg/头),分别为:纯母乳喂养组(对照组)和饲喂母乳的同时添加代乳料的混合喂养组(试验组)(n=5)。仔猪出生后第4天开始对试验组仔猪添加商业代乳料,直到仔猪28日龄断奶。断奶后,所有仔猪饲喂相同的日粮直到35日龄。
1.2.2 粪便采集
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