番茄mir482编码基因克隆及过表达转基因植株构建筛选

前期研究表明，蜡质芽胞杆菌AR156通过同时激活SA、JA/ET两个信号通路诱导拟南芥及番茄产生系统抗病性，同时伴随着细胞水平上的活性氧迸发、胼胝质沉积和染色质凝集等现象的发生，以及分子水平上的SAR、ISR标志基因的表达。在对AR156诱导系统抗性过程中不同时间点取样并进行高通量测序时，我们发现sly-miR482在AR156处理后表达丰度明显降低，Northern blot检测结果和测序结果一致。因此我们假设sly-miR482在蜡质芽胞杆菌AR156诱导植物产生系统抗性过程中起着重要的作用。为研究解析sly-miR482在调控蜡质芽胞杆菌AR156诱导植物系统抗性过程中的作用机制，通过Gateway克隆技术对sly-miR482a、sly-miR482b、sly-miR482c、sly-miR482d、sly-miR482e基因进行克隆，后利用农杆菌介导的叶盘转化法，在番茄植株内进行过量表达，获得过表达转基因植株。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料与方法2
1.1材料 2
1.2方法 3
1.2.1目的基因材料准备 3
1.2.2转基因植株构建3
1.2.3转基因植株筛选3
2结果与分析3
2.1目的基因材料准备3
2.1.1目的基因克隆3
2.1.2连接过渡载体后转入大肠杆菌4
2.1.3提取大肠杆菌质粒并作酶切5
2.1.4同源重组将目的基因连接最终载体6
2.1.5目的基因转入农杆菌7
2.2转基因植株构建8
2.3转基因植株筛选8
3讨论 9
3.1目的基因材料获取阶段9
3.2转基因番茄植株构建筛选阶段9
3.3总结9
致谢10
参考文献10
过表达slymiR482基因番茄构建筛选

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