fluralaner对二化螟的毒力测定及其靶标受体的克隆分析

本文采用点滴法测定了fluralaner和氟虫腈对室内饲养的二化螟品系4龄幼虫的毒力,结果表明,在药剂处理24h和48h后,fluralaner和氟虫腈对二化螟的LD50值分别为0.022μg/头、0.025μg/头和0.003μg/头、0.004μg/头。在杀虫活性方面,处理48h后,两种药剂对二化螟4龄幼虫的毒杀作用都比24h明显增大。比较两者在48h时的LD50值可知,fluralaner对二化螟4龄幼虫的毒力大于氟虫腈,具有良好的杀虫效果。Fluralaner和氟虫腈的作用靶标均为二化螟GABA受体,故以二化螟的cDNA为模板,采用RT-PCR和RACE PCR技术得到了二化螟GABA受体的一个亚基的基因,并对其进行了相关的生物信息学分析,包括序列的一级、二级结构分析、进化树的构建与跨膜区预测,确定其为LCCH3亚基。LCCH3亚基的获得将为二化螟GABA受体的研究提供基础性信息。
目录
摘要 1
关键词 1
Abstract 1
Key words 1
引言 1
第一章 二化螟的饲养 2
1 饲养方法 2
2 饲养条件及设备 2
3 饲养过程 2
3.1 饲养器具的清洗及消毒 2
3.2 水稻幼苗培养 2
3.3 虫源采集 2
3.4 幼虫饲养 2
3.5 化蛹管理 2
3.6 羽化及产卵 3
第二章 Fluralaner与氟虫腈对二化螟的毒力测定 3
1 材料与方法 3
1.1 供试昆虫 3
1.2 供试药剂 3
1.3 毒力测定方法 3
1.4 统计分析方法 3
2 结果与分析 3
2.1 Fluralaner对室内二化螟品系的毒力测定结果 3
2.2 氟虫腈对室内二化螟品系的毒力测定结果 4
2.3 分析与比较 4
3 讨论 4
第三章 二化螟GABA受体亚基的克隆与生物信息学分析 5
1 试验材料 5
1.1 供试昆虫 5
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.2 主要试剂 5
1.3 主要仪器设备 5
1.4 其他材料 5
2 试验方法 6
2.1 二化螟总RNA的提取 6
2.2 cDNA第一条链的合成 7
2.3 二化螟GABA受体cDNA序列的克隆 7
2.4 PCR产物回收与纯化 8
2.5 目的DNA的连接 8
2.6 连接产物的转化及扩大培养 8
2.7 阳性克隆的检测 8
2.8 菌液PCR验证 9
2.9 二化螟GABA受体亚基基因的RACE克隆 9
2.10 Endtoend PCR 验证 10
3 二化螟GABA受体LCCH3亚基的生物信息学分析 10
3.1 序列的一级、二级结构分析 10
3.2 进化树的构建 10
3.3 跨膜区预测 11
4 结果与分析 11
4.1 片段克隆 11
4.2 生物信息学分析 12
5 讨论 15
致谢 15
参考文献 16
Fluralaner对二化螟的毒力测定及其靶标受体的克隆分析

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