姜黄素对小鼠肝脏生物钟及脂代谢的影响

本试验研究姜黄素对小鼠肝脏生物钟和脂代谢的影响。选取48只8周龄的C57BL/6J的健康雄性小鼠,随机分为3组,分别腹腔注射200mg/kg/d生理盐水、200与400 mg/kg/d姜黄素,每组8个重复,每个重复1只,分别在6:00和18:00屠宰采样,检测其血清和肝脏中脂代谢与生物钟基因表达情况,从而推测出姜黄素在小鼠肝脏生物钟及脂代谢方面的作用。结果表明添加不同浓度姜黄素对小鼠体重变化、脂代谢运行的影响差异不显著(P>0.05);姜黄素使CLOCK基因表达量呈降低趋势,BMAL1和PER-1基因表达量随姜黄素剂量的增加在上午组先降后升,在下午组先升后降。结论姜黄素对脂代谢的影响不显著,对BMAL1和PER-1基因的表达情况存在时间差异影响,对生物钟CLOCK基因有抑制表达的作用。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料与方法2
1.1材料 2
1.1.1试验动物 2
1.1.2主要试剂和药品 2
1.1.3试验仪器 3
1.1.4饲养管理 3
1.1.5样品采集与处理 3
1.2方法 3
1.2.1血清与肝脏中TC、TG、LDLC、HDLC的测定 3
1.2.2肝脏中Clock、Bmal1和Per11表达的测定 4
1.2.3数据整理与处理 5
2结果与分析5
2.1姜黄素对小鼠体重的影响 5
2.2姜黄素对小鼠脂代谢的影响 5
2.2.1姜黄素对小鼠血清脂代谢的影响5
2.2.2姜黄素对小鼠肝脏脂代谢的影响6
2.3姜黄素对小鼠生物钟基因表达的影响6
3讨论7
3.1姜黄素对小鼠体重的影响 7
3.2姜黄素对小鼠脂代谢的影响 7
3.3姜黄素对小鼠生物钟基因表达的影响 7
致谢8
参考文献8
姜黄素对小鼠肝脏生物钟及脂代谢的影响
引言
姜黄素( Curcumin),提取自姜科植物 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ¥351916072$ 
姜黄的块茎中,是分子量为368.37的酸性酚类色素,化学结构为C21H20O6。稳定性不好,见光易分解,易溶于有机溶剂,但难溶于水。之前因为色泽清晰的特点,在食品染色剂方面得到广泛应用。近来,姜黄素更多药理学方面作用在大量试验中得到证明,如抗肿瘤、抗纤维化、抗氧化、抗炎症、治疗心血管疾病以及调节血糖血脂等[1]。另外,姜黄素安全性高,有动物试验证明5g/kg的大剂量姜黄素对大鼠无不良影响。经试验,大鼠被长期连续地饲喂为100倍的成年人用量的姜黄素,仍然能正常进食,相较对照组,试验组大鼠体重并无显著变化,病理学检查也表明试验组大鼠的内部器官均未出现损伤[2]。三期临床试验表明人在每天摄入较高的姜黄素的情况下依然表现出良好的耐受性,并且不呈现显著的毒副作用[3]。姜黄素具有丰富有效的药理作用,且几近无毒的特点,使其在医药保健领域受到国内外众多研究人员的关注。在本试验中就是结合了生物钟紊乱与脂代谢失衡这种热点问题,对姜黄素的作用进行了相关试验。
生物钟,是生物体为适应外界环境所发生的内在节律性的生理变化的现象。根据生物节律起搏器位置的区别,哺乳动物体内的生物钟分为中枢生物钟和外周生物钟两种,前者位于下丘脑视交叉上核上,后者则广泛存在于SCN以外的外周组织上,如肝脏、心脏和成纤维细胞等。二者通过自主神经网络和内分泌激素等实现信号传递以相互协调,构建成生命体内在时间控制系统。中枢生物钟主要受光信号的调节,而外周生物钟的调控因素有许多方面,如进食、饥饿等构成授时因子,可以影响外周节律,但具体如何影响生物钟相关基因的表达,仍是难题。目前普遍观念认为,由一系列钟基因构成的“转录翻译抑转录”反馈环维持了生物节律[4]。包括CLOCK、BMAL1、PER(s)、CRY(s)以及REVERBα等在内的重要基因与一些对应的蛋白质产物共同组成了生物钟的分子基础[5],适应外界信号变化,维持体内生物钟系统的正常工作。
脂代谢,是三大物质代谢之一,在机体能量的储蓄与应用、生物膜的构成等一些重要机体内部反应过程中发挥了重要作用。脂代谢紊乱将会导致许多疾病发生概率的激增,如肥胖、脂肪肝、糖尿病以及心脑血管病等[6]。
值得关注的是,姜黄素有降血脂的显著效果,如赵慧娟等[7]通过建立姜黄素干预组和对照组试验证明姜黄素能降低血瘦素(LP)和TNFα水平,升高脂联素(ADP)水平,以有效缓解代谢综合征。在沃兴德[8]等用100mg/kg/d和200mg/kg/d的剂量对患有高血脂症的大鼠进行治疗的试验中,两种剂量的姜黄素都能有效降血脂,血清中甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)含量降低,高度脂蛋白胆固醇(HDLC)含量增高。Mahesh等(2005) [9]的研究发现姜黄素对STZ(链脲佐菌素)诱导的糖尿病大鼠模型存在显著降低血糖水平的效果。
生物钟作为生物体内众多生理生化反应发生的调控基础,对代谢过程也有较大的影响。2012年,姜子超[10]等的试验结果证明了生物钟对代谢生理的调控:与健康对照小鼠组以及维持正常节律的糖尿病小鼠组相比,生物钟紊乱的糖尿病小鼠组的肾脏、肝脏出现更严重的损伤性变化,推测是节律紊乱影响了小鼠空腹血糖水平,从而使内部器官结构破坏的程度加深、进程加快。
在本试验中,选择48只8周龄的C57BL/6J的雄性健康小鼠分成三组,腹腔注射不同浓度的姜黄素以及生理盐水,饲喂14d后,采取血清和肝脏样品,测定其中胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDLC)和高密度脂蛋白(HDLC)的含量,并通过实时荧光定量PCR测定生物钟相关基因CLOCK、BMAL1和PER1 mRNA的表达量,以探讨姜黄素对小鼠肝脏生物钟以及脂质代谢的调节作用。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 试验动物
本次试验采用单因素完全随机化设计。选取48只8周龄的C57BL/6J的健康雄性小鼠,进行适应性喂养7天后将实验动物随机分为3组,每组8个重复,每个重复1只,分别在上午6:00 和下午18:00宰杀取样。
1.1.2 主要试剂和药品
姜黄素购于Sigma公司。

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