慢病毒载体介导的cdh22基因knockdown及相关信号通路研究

CDH22是钙粘附蛋白( cadherin) 家族经典型亚类成员之一，Cdh22基因的编码产物在大鼠中存在两种剪切形式，其中STPB-C（short-type PB-cadherin）通过激活JAK-STAT和PI3-K/Akt通路和封闭TGF-β1通路来促进大鼠睾丸中精原细胞的自我更新。但在小鼠中该基因只表达一种编码产物，其生物学功能尚不明确。本实验通过RNA干扰技术以慢病毒载体为介导，敲低CDH22基因，Western-blot结果显示shRNA能够有效干扰Cdh22基因的表达，有较高的敲低效率，Stat3的表达量未受影响，而PCNA的表达量有所下降，表明细胞的生长在一定程度上受到了抑制。这表明，CDH22可能不是通过干扰Stat3的表达来调控细胞增殖活性。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言（或绪论）1
1材料与方法1
1.1材料1
1.1.1试剂1
1.1.2仪器2
1.2方法2
1.2.1 Cdh22基因慢病毒载体的构建2
1.2.2慢病毒的包装2
1.2.3慢病毒感染3T3细胞3
1.2.4 Westernblot3
2结果与分析3
2.1 shRNA的设计与合成3
2.2载体的构建3
2.3慢病毒的包装与3T3细胞的感染4
2.4 Westernblot检测Cdh22蛋白质的表达6
3讨论6
致谢7
参考文献7
附录shRNA慢病毒载体PCR测序结果8
慢病毒载体介导的Cdh22基因knockdown及相关信号通路研究

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