真核表达质粒pvaxptx3临床抗菌作用研究
正五聚蛋白3（PTX3）是一种可溶性模式识别受体，在先天免疫中起重要作用，并可能参与抵抗猪链球菌2型感染。本研究将成功构建的重组真核表达质粒pVAX-ptx3以500μg/只的剂量免疫新生仔猪36头，同时设置对照组。仔猪断奶一周后（免疫35天后），各随机挑选3只仔猪，耳缘静脉注射SS2 HA9801( 1×108 CFU)。对感染仔猪进行外周全血载菌量的检测,以及各脏器活菌载菌量的测定。结果显示，免疫组外周血及各脏器活菌载量显著低于对照组，同时免疫组仔猪的存活率(100%)显著高于对照组(33.3%)。研究结果表明pVAX-ptx3对仔猪具有一定的保护作用，其表达的PTX3蛋白对猪链球菌2型有一定的抗菌作用，有望作为抗猪链球菌的新型生物制剂。
目录
摘要 1
关键词 1
Abstract 1
Key words 1
引言1
1 材料和方法 2
1.1 材料 2
1.1.1 质粒和试剂 2
1.1.2 主要仪器 2
1.1.3 菌株与培养条件 2
1.1.4 试验动物 3
1.2 方法 3
1.2.1 pVAXptx3重组菌的复苏及鉴定 3
1.2.1.1 pVAXptx3重组菌的复苏 3
1.2.1.2 pVAXptx3重组菌的PCR鉴定 3
1.2.2 重组真核表达载体pVAXptx3的大量提取3
1.2.3 pVAXptx3对仔猪的免疫 4
1.2.4 SS2 HA9801菌株的复苏与复壮 4
1.2.5 pVAXptx3在仔猪模型中的抗菌作用 4
1.2.5.1 SS2 HA9801的攻毒试验 4
1.2.5.2 pVAXptx3作用下仔猪外周血活菌量的变化 4
1.2.5.3 pVAXptx3作用下猪链球菌2型感染仔猪组织活菌测定 5
2 结果与分析5
2.1 重组真核表达载体pVAXptx3的PCR鉴定5
2.2 重组真核表达质粒pVAX ptx3双酶切鉴定 5
2.3 pVAX *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072#
ptx3作用下仔猪生长状况差异 6
2.4 SS2 HA9801的复壮、镜检6
2.5 仔猪发病临床症状和病理变化6
2.6 仔猪外周血姬姆萨染色结果7
2.7 pVAXptx3作用下感染SS2 HA9801仔猪外周血载菌量分布变化 8
2.8 pVAXptx3作用下感染SS2 HA9801的仔猪组织活菌分布结果 8
2.9 pVAXptx3作用下对感染SS2 HA9801的仔猪的免疫保护 9
3 讨论 9
致谢 10
参考文献： 11
图1 重组菌的PCR鉴定 5
图2 复苏菌液革兰氏染色显微镜观察（10×100） 6
图3 感染HA9801仔猪临床症状 7
图4 感染HA9801仔猪病理变化 7
图5 感染HA9801仔猪4h外周血显微镜观察（10×100） 8
图6 pVAXptx3作用下感染猪链球菌2型HA9801仔猪血液载菌量变化 8
图7 pVAXptx3作用下仔猪感染SS2 HA9801后组织载菌量 9
表1 pVAXptx3作用下仔猪生长状况差异5
表2 pVAXptx3作用下HA9801攻毒保护试验结果 9
真核表达质粒pVAXptx3临床抗菌作用研究
目录
摘要 1
关键词 1
Abstract 1
Key words 1
引言1
1 材料和方法 2
1.1 材料 2
1.1.1 质粒和试剂 2
1.1.2 主要仪器 2
1.1.3 菌株与培养条件 2
1.1.4 试验动物 3
1.2 方法 3
1.2.1 pVAXptx3重组菌的复苏及鉴定 3
1.2.1.1 pVAXptx3重组菌的复苏 3
1.2.1.2 pVAXptx3重组菌的PCR鉴定 3
1.2.2 重组真核表达载体pVAXptx3的大量提取3
1.2.3 pVAXptx3对仔猪的免疫 4
1.2.4 SS2 HA9801菌株的复苏与复壮 4
1.2.5 pVAXptx3在仔猪模型中的抗菌作用 4
1.2.5.1 SS2 HA9801的攻毒试验 4
1.2.5.2 pVAXptx3作用下仔猪外周血活菌量的变化 4
1.2.5.3 pVAXptx3作用下猪链球菌2型感染仔猪组织活菌测定 5
2 结果与分析5
2.1 重组真核表达载体pVAXptx3的PCR鉴定5
2.2 重组真核表达质粒pVAX ptx3双酶切鉴定 5
2.3 pVAX *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072#
ptx3作用下仔猪生长状况差异 6
2.4 SS2 HA9801的复壮、镜检6
2.5 仔猪发病临床症状和病理变化6
2.6 仔猪外周血姬姆萨染色结果7
2.7 pVAXptx3作用下感染SS2 HA9801仔猪外周血载菌量分布变化 8
2.8 pVAXptx3作用下感染SS2 HA9801的仔猪组织活菌分布结果 8
2.9 pVAXptx3作用下对感染SS2 HA9801的仔猪的免疫保护 9
3 讨论 9
致谢 10
参考文献： 11
图1 重组菌的PCR鉴定 5
图2 复苏菌液革兰氏染色显微镜观察（10×100） 6
图3 感染HA9801仔猪临床症状 7
图4 感染HA9801仔猪病理变化 7
图5 感染HA9801仔猪4h外周血显微镜观察（10×100） 8
图6 pVAXptx3作用下感染猪链球菌2型HA9801仔猪血液载菌量变化 8
图7 pVAXptx3作用下仔猪感染SS2 HA9801后组织载菌量 9
表1 pVAXptx3作用下仔猪生长状况差异5
表2 pVAXptx3作用下HA9801攻毒保护试验结果 9
真核表达质粒pVAXptx3临床抗菌作用研究
版权保护: 本文由 hbsrm.com编辑，转载请保留链接: www.hbsrm.com/yxlw/dwyx/450.html
