表达边界病病毒E2蛋白的重组杆状病毒构建
表达边界病病毒E2蛋白的重组杆状病毒构建[20200507183131]
摘要：为获得边界病病毒E2蛋白，RT-PCR扩增边界病病毒中国分离株E2蛋白基因，通过酶切克隆入pFastBacHTB中，经PCR和测序鉴定正确的阳性重组质粒转化DH10Bac，经蓝白菌落筛选，挑取白色菌落提取Bacmid，将PCR鉴定正确重组的Bacmid转染Sf9 昆虫细胞，获得重组杆状病毒,采用PCR鉴定目的基因的存在，并通过Western blot鉴定重组蛋白的表达。这为进一步研究E2 蛋白的功能及BDV新型疫苗的研发起重要作用。
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关键字:构建；边界病病毒；E2；重组杆状病毒
摘要：为获得边界病病毒E2蛋白，RT-PCR扩增边界病病毒中国分离株E2蛋白基因，通过酶切克隆入pFastBacHTB中，经PCR和测序鉴定正确的阳性重组质粒转化DH10Bac，经蓝白菌落筛选，挑取白色菌落提取Bacmid，将PCR鉴定正确重组的Bacmid转染Sf9 昆虫细胞，获得重组杆状病毒,采用PCR鉴定目的基因的存在，并通过Western blot鉴定重组蛋白的表达。这为进一步研究E2 蛋白的功能及BDV新型疫苗的研发起重要作用。
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