副猪嗜血杆菌病的临床诊断鉴定
副猪嗜血杆菌是猪革拉斯氏病的病原菌，常引起猪的浆膜炎、关节炎以及脑膜炎。随着我国规模化养猪场的发展，副猪嗜血杆菌感染有明显增加趋势，已成为猪场保育仔猪发病率和死亡率增加的重要原因之一，并给养猪业造成重大经济损失。本文通过对患副猪嗜血杆菌病的保育猪进行一般猪病临床诊断鉴定，包括问诊、望诊、病理剖检和一系列的细菌学检查，从而能够准确做出诊断，并在最后比较几种引发猪呼吸道疾病的临床症状，流行特点和病理变化特征,以期为副猪嗜血杆菌的临床诊断提供一些参考资料。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言（或绪论）1
1材料与方法1
1.1实验材料 1
1.1.1实验动物2
1.1.2试剂2
1.1.3需要消毒的用品2
1.1.4其他用品2
1.2 方法2
1.2.1问诊2
1.2.2望诊2
1.2.3病理剖检2
1.2.4细菌学检查3
2结果与分析4
2.1问诊结果4
2.2望诊结果5
2.3病理剖检结果 5
2.4细菌学检查结果5
2.4.1细菌分离培养结果5
2.4.2镜检5
2.4.3生化鉴定结果6
2.4.4药敏试验结果6
2.4.5细菌鉴定结果7
3讨论 7
致谢8
参考文献8
副猪嗜血杆菌病的临床诊断鉴定
引言
中国是世界上养猪大国，也是猪肉消费大国，然而，现实是中国的养猪生产效率和养猪大国不成比例。因为中国的猪肉消费市场大，而猪的生产效率低，导致我国养猪的成本比欧洲和美国要高的多。我国猪病的复杂情况是猪生产效率底的主要原因之一，所以猪病的临床诊断鉴定十分重要。
副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)又称为猪革拉斯氏病(Glasser’s Disease)。主要感染3050日龄仔猪和保育猪，常引起浆膜性炎、关节炎和脑膜炎，而且这种病菌常常作为继发 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥351916072￥
病原伴随其他主要病原造成混合感染。副猪嗜血杆菌病的发病率、死亡率高，影响猪生产的各个阶段，危害很大。
本实验在江苏省农科院动物疫病检测中心进行，实习期间约有80头病猪送检，其中患副猪嗜血杆菌病的有4头。通过一般临床诊断鉴定的方法，对患副猪嗜血杆菌病的保育猪进行的问诊、望诊、病例剖检和一系列细菌学检查，然后准确作出诊断，最后对结果进行了分析，并对几种引起猪呼吸道疾病的临床症状，流行性特点和病理变化特征进行了比较。
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1实验动物
2015年春江苏宿迁宏伟猪场发生疫情，仔猪、保育猪大片死亡。畜主送检4头40日龄患病保育猪至江苏省农业科学院，猪外观精神萎靡，咳喘不停，四肢无力跛行，其中一头在运送途中已死亡。
1.1.2 试剂
（1）生化反应管：商品化的葡萄糖、蔗糖、果糖、半乳糖、核糖、麦芽糖、脲酶、氧化酶、氧化酶、接触酶、硝酸盐生化反应管（产自上海科鉴生物科技有限公司）
（2）商品化试剂：革兰氏染色液、药敏试纸、PCR试剂、Hps的16SrRNA的序列设计引物、琼脂糖、TSA平板、TSB液体培养基、生理盐水、细胞维持液、TE缓冲液（产自上海科鉴生物科技有限公司）
（3）细菌：金黄色葡萄球菌
1.1.3 需要灭菌消毒的用品
手术刀、剪刀、大镊子、小镊子、细菌涂布棒、1.5mL离心管、枪头、PCR管、玻璃匀浆器、小滤器、小青瓶
1.1.4 其他用品
解剖盘、酒精灯、解剖刀、注射器、接种环、载玻片、染色缸、酒精棉球、乳胶手套、光学显微镜
1.2方法
1.2.1 问诊
向畜主或饲养员了解猪在发病前后的饲养管理、发病经过、主要症状以及是否治疗、用过何药、免疫接种等情况，还需了解附近是否有猪病流行、死亡情况等[2]。如果病猪发生气喘、呼吸困难则应怀疑副猪嗜血杆菌病、气喘病、猪流感和猪肺疫等病。
1.2.2 望诊
观察病猪的症状，包括检查呼吸、体温、体表等，并观察鼻镜、舌苔、肛门、尿道口、黏液或分泌物、排泄物等[3]。如果病猪发热，可视粘膜发绀，共济失调则应怀疑是副猪嗜血杆菌病。
1.2.3 病理剖检
(1)腹腔剖检
置病死猪成背卧位姿势，先切断肩胛骨内侧和髋关节周围的肌肉，使四肢摊开，然后沿腹中线进刀，向前切至下颌骨，向后到肛门，掀开皮肤，再切开剑状软骨与肛门之间的腹壁，沿左右最后肋骨切腹壁至脊柱部，这样使腹腔脏器全部暴露。此时，检查腹腔脏器的位置是否正常、有无异物和寄生虫，腹壁有无粘连，腹水的容量和颜色是否正常。然后有隔处切断食管，在骨盆腔处切断直肠，按脾、肠、胃、肝、肾次序分别取出。
(2)胸腔剖检
沿季肋部切去膈膜，先用刀或骨剪切断肋软骨和胸骨连接部，再将刀深入胸腔，划断脊柱两侧肋骨和胸椎连接部的胸膜和肌肉，然后用两手按压两侧的胸壁肋骨，则肋骨和胸椎连接处的关节自行拆裂而使胸腔敞开。首先检查胸腔液的量和性状，胸膜的色泽和光滑度，有无出血、炎症或粘连，然后摘取心、肺等胸腔脏器进行检查。
(3)其他器官采取
在脏器检查完后，剥去颈部和下颌部皮肤后，用刀切断两下颌的内侧和舌连接的肌肉，左手指深入下颌间隙，将舌牵出，剪断舌骨，将舌咽喉和气管一并取出，观察气管有无粘液、出血点等，扁桃体有无肿大、出血点等。清除头部的皮肤和肌肉，在两眼眶间横断额骨，然后再将两侧颞骨(与颧骨平行)及枕骨髁劈开，即可掀开顶骨，暴露颅骨，检查脑膜有无充血、出血，必要时取材送检[4]。
1.2.4 细菌学检查
(1) 细菌分离培养
首先将剖检采取的病料（如心脏、肺脏）消毒，用剪刀剪下小块病料，用镊子夹住病料并涂抹在事先准备好的平板上（或者抽取渗出的浆液涂布平板）37℃培养24小时后得到混杂的细菌，再接种到另一块平板上，通过在平板上划线，将混杂的细菌在琼脂平板表面充分的分散开，使单个细菌能固定在一点上生长繁殖，形成单个菌落，以达到分离纯种的目的。若需从平板上获取纯种，则挑取一个单个菌落作纯培养[5]。
操作方法（三区划线法）：
①右手拿接种环，烧灼冷却后，取菌液一环。
②左手抓握琼脂平板（让皿盖留于桌上），在酒精灯火焰左前上方，使平板面向火焰，以免空中杂菌落入，右手将已沾菌的接种环在琼脂表面密集而不重叠的来回划线，面积约占整个平板的1/51/6，此为第一区。划线时接种环与琼脂呈3040度角轻轻接触，利用腕力滑动，切忌划破琼脂。
③接种环上多余的细菌可烧灼（每划完一个区域是否需要烧灼灭菌视标本中含菌量多少而定），待冷后，在划线末端重复23根线后，再划下一区域（约占1/4面积），此为第二区。第二区划完后可不烧灼接种环，用同样方法划第三区，划满整个平皿。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言（或绪论）1
1材料与方法1
1.1实验材料 1
1.1.1实验动物2
1.1.2试剂2
1.1.3需要消毒的用品2
1.1.4其他用品2
1.2 方法2
1.2.1问诊2
1.2.2望诊2
1.2.3病理剖检2
1.2.4细菌学检查3
2结果与分析4
2.1问诊结果4
2.2望诊结果5
2.3病理剖检结果 5
2.4细菌学检查结果5
2.4.1细菌分离培养结果5
2.4.2镜检5
2.4.3生化鉴定结果6
2.4.4药敏试验结果6
2.4.5细菌鉴定结果7
3讨论 7
致谢8
参考文献8
副猪嗜血杆菌病的临床诊断鉴定
引言
中国是世界上养猪大国，也是猪肉消费大国，然而，现实是中国的养猪生产效率和养猪大国不成比例。因为中国的猪肉消费市场大，而猪的生产效率低，导致我国养猪的成本比欧洲和美国要高的多。我国猪病的复杂情况是猪生产效率底的主要原因之一，所以猪病的临床诊断鉴定十分重要。
副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)又称为猪革拉斯氏病(Glasser’s Disease)。主要感染3050日龄仔猪和保育猪，常引起浆膜性炎、关节炎和脑膜炎，而且这种病菌常常作为继发 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥351916072￥
病原伴随其他主要病原造成混合感染。副猪嗜血杆菌病的发病率、死亡率高，影响猪生产的各个阶段，危害很大。
本实验在江苏省农科院动物疫病检测中心进行，实习期间约有80头病猪送检，其中患副猪嗜血杆菌病的有4头。通过一般临床诊断鉴定的方法，对患副猪嗜血杆菌病的保育猪进行的问诊、望诊、病例剖检和一系列细菌学检查，然后准确作出诊断，最后对结果进行了分析，并对几种引起猪呼吸道疾病的临床症状，流行性特点和病理变化特征进行了比较。
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1实验动物
2015年春江苏宿迁宏伟猪场发生疫情，仔猪、保育猪大片死亡。畜主送检4头40日龄患病保育猪至江苏省农业科学院，猪外观精神萎靡，咳喘不停，四肢无力跛行，其中一头在运送途中已死亡。
1.1.2 试剂
（1）生化反应管：商品化的葡萄糖、蔗糖、果糖、半乳糖、核糖、麦芽糖、脲酶、氧化酶、氧化酶、接触酶、硝酸盐生化反应管（产自上海科鉴生物科技有限公司）
（2）商品化试剂：革兰氏染色液、药敏试纸、PCR试剂、Hps的16SrRNA的序列设计引物、琼脂糖、TSA平板、TSB液体培养基、生理盐水、细胞维持液、TE缓冲液（产自上海科鉴生物科技有限公司）
（3）细菌：金黄色葡萄球菌
1.1.3 需要灭菌消毒的用品
手术刀、剪刀、大镊子、小镊子、细菌涂布棒、1.5mL离心管、枪头、PCR管、玻璃匀浆器、小滤器、小青瓶
1.1.4 其他用品
解剖盘、酒精灯、解剖刀、注射器、接种环、载玻片、染色缸、酒精棉球、乳胶手套、光学显微镜
1.2方法
1.2.1 问诊
向畜主或饲养员了解猪在发病前后的饲养管理、发病经过、主要症状以及是否治疗、用过何药、免疫接种等情况，还需了解附近是否有猪病流行、死亡情况等[2]。如果病猪发生气喘、呼吸困难则应怀疑副猪嗜血杆菌病、气喘病、猪流感和猪肺疫等病。
1.2.2 望诊
观察病猪的症状，包括检查呼吸、体温、体表等，并观察鼻镜、舌苔、肛门、尿道口、黏液或分泌物、排泄物等[3]。如果病猪发热，可视粘膜发绀，共济失调则应怀疑是副猪嗜血杆菌病。
1.2.3 病理剖检
(1)腹腔剖检
置病死猪成背卧位姿势，先切断肩胛骨内侧和髋关节周围的肌肉，使四肢摊开，然后沿腹中线进刀，向前切至下颌骨，向后到肛门，掀开皮肤，再切开剑状软骨与肛门之间的腹壁，沿左右最后肋骨切腹壁至脊柱部，这样使腹腔脏器全部暴露。此时，检查腹腔脏器的位置是否正常、有无异物和寄生虫，腹壁有无粘连，腹水的容量和颜色是否正常。然后有隔处切断食管，在骨盆腔处切断直肠，按脾、肠、胃、肝、肾次序分别取出。
(2)胸腔剖检
沿季肋部切去膈膜，先用刀或骨剪切断肋软骨和胸骨连接部，再将刀深入胸腔，划断脊柱两侧肋骨和胸椎连接部的胸膜和肌肉，然后用两手按压两侧的胸壁肋骨，则肋骨和胸椎连接处的关节自行拆裂而使胸腔敞开。首先检查胸腔液的量和性状，胸膜的色泽和光滑度，有无出血、炎症或粘连，然后摘取心、肺等胸腔脏器进行检查。
(3)其他器官采取
在脏器检查完后，剥去颈部和下颌部皮肤后，用刀切断两下颌的内侧和舌连接的肌肉，左手指深入下颌间隙，将舌牵出，剪断舌骨，将舌咽喉和气管一并取出，观察气管有无粘液、出血点等，扁桃体有无肿大、出血点等。清除头部的皮肤和肌肉，在两眼眶间横断额骨，然后再将两侧颞骨(与颧骨平行)及枕骨髁劈开，即可掀开顶骨，暴露颅骨，检查脑膜有无充血、出血，必要时取材送检[4]。
1.2.4 细菌学检查
(1) 细菌分离培养
首先将剖检采取的病料（如心脏、肺脏）消毒，用剪刀剪下小块病料，用镊子夹住病料并涂抹在事先准备好的平板上（或者抽取渗出的浆液涂布平板）37℃培养24小时后得到混杂的细菌，再接种到另一块平板上，通过在平板上划线，将混杂的细菌在琼脂平板表面充分的分散开，使单个细菌能固定在一点上生长繁殖，形成单个菌落，以达到分离纯种的目的。若需从平板上获取纯种，则挑取一个单个菌落作纯培养[5]。
操作方法（三区划线法）：
①右手拿接种环，烧灼冷却后，取菌液一环。
②左手抓握琼脂平板（让皿盖留于桌上），在酒精灯火焰左前上方，使平板面向火焰，以免空中杂菌落入，右手将已沾菌的接种环在琼脂表面密集而不重叠的来回划线，面积约占整个平板的1/51/6，此为第一区。划线时接种环与琼脂呈3040度角轻轻接触，利用腕力滑动，切忌划破琼脂。
③接种环上多余的细菌可烧灼（每划完一个区域是否需要烧灼灭菌视标本中含菌量多少而定），待冷后，在划线末端重复23根线后，再划下一区域（约占1/4面积），此为第二区。第二区划完后可不烧灼接种环，用同样方法划第三区，划满整个平皿。
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