sirt3在糖尿病小鼠卵子中的作用研究
已经证实母源糖尿病对小鼠卵母细胞的质量有一定的不良影响。但是，其潜在的分子机制却鲜少有报道。由于糖尿病小鼠的卵母细胞代谢紊乱，线粒体功能也发生异常，本研究通过建立一种I型糖尿病小鼠模型，发现相对于正常小鼠的卵母细胞，来自糖尿病小鼠卵母细胞的活性氧化物（ROS）显著增加，但是Sirt3表达水平却明显降低。我们在糖尿病小鼠的卵母细胞中过量表达Sirt3，能够减弱这种ROS的过量产生。这些结果暗示Sirt3能够保护卵子在糖尿病环境下免收氧化应激的不利影响，这为全面了解卵母细胞发育调控网络和改善卵子质量提供了新的思路和途径。
目录
摘要4
关键词4
Abstract4
Key words4
引言4
1材料与方法5
1.1材料 5
1.1.1 抗体和试剂5
1.1.2 实验动物5
1.2方法 5
1.2.1卵母细胞的收集与培养 5
1.2.2sirt3质粒构建与mRNA合成以及显微注射5
1．2．2 .1 提取总RNA5
1.2.2.2逆转录RNA5
1.2.2.3设计引物5
1.2.2.4双酶切5
1.2.2.5 PCR产物和载体连接6
1.2.2.6 转化6
1.2.2.7 涂板6
1.2.2.8 挑克隆，验证序列6
1.2.2.9 质粒提取6
1.2.2.10 线性化6
1.2.2.11 体外转录6
1.2.2.12 取GV期卵母细胞6
1.2.3免疫荧光染色和共聚焦显微镜检测6
1.2.4蛋白免疫印记6
1.2.5 数据分析7
2结果7
2．1 糖尿病小鼠的卵母细胞中ROS水平升高7
2.2 Sirt3在糖尿病小鼠卵母细胞中表达量下降 8
2.3 Sirt3过表达减弱糖尿病小鼠卵母细胞中ROS的产生8
3讨论9
致谢10
参考文献11
Sirt3在糖尿病小鼠卵子中的作用研究 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: &351916072&
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关键词4
Abstract4
Key words4
引言4
1材料与方法5
1.1材料 5
1.1.1 抗体和试剂5
1.1.2 实验动物5
1.2方法 5
1.2.1卵母细胞的收集与培养 5
1.2.2sirt3质粒构建与mRNA合成以及显微注射5
1．2．2 .1 提取总RNA5
1.2.2.2逆转录RNA5
1.2.2.3设计引物5
1.2.2.4双酶切5
1.2.2.5 PCR产物和载体连接6
1.2.2.6 转化6
1.2.2.7 涂板6
1.2.2.8 挑克隆，验证序列6
1.2.2.9 质粒提取6
1.2.2.10 线性化6
1.2.2.11 体外转录6
1.2.2.12 取GV期卵母细胞6
1.2.3免疫荧光染色和共聚焦显微镜检测6
1.2.4蛋白免疫印记6
1.2.5 数据分析7
2结果7
2．1 糖尿病小鼠的卵母细胞中ROS水平升高7
2.2 Sirt3在糖尿病小鼠卵母细胞中表达量下降 8
2.3 Sirt3过表达减弱糖尿病小鼠卵母细胞中ROS的产生8
3讨论9
致谢10
参考文献11
Sirt3在糖尿病小鼠卵子中的作用研究 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: &351916072&
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