丁酸甘油酯对IUGR仔猪生长及脾脏免疫功能的影响
丁酸甘油酯对IUGR仔猪生长及脾脏免疫功能的影响[20200510204802]
摘要：以“杜×长×大”三元杂交仔猪为研究对象，探讨丁酸甘油酯对IUGR仔猪生长及脾脏发育、免疫功能的影响。试验选取0d仔猪24头，分别设置对照组、试验组1与试验组2，每个处理设8个重复。对照组（正常出生体重，以下简称NBW）饲喂基础日粮，试验组1（IUGR组）基础日粮，试验组2（IUGR仔猪+丁酸甘油酯，以下简称IT组）饲喂基础日粮+0.10%丁酸甘油酯。21d时，每组选取6头仔猪进行屠宰取样，测定血清及脾脏中胰岛素样生长因子-1（IGF-1）含量，脾脏IGF-1、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素4（IL-4），脾脏IGF-1、TNF-α、IL-4、Hsp60、Hsp70、Hsp90 mRNA的表达。结果如下：（1）IUGR仔猪体重、脾脏重、脾脏指数显著低于正常仔猪（P<0.05），而丁酸甘油酯能够显著提高IUGR仔猪体重、脾脏重和脾脏指数（P<0.05）；（2）IUGR显著降低仔猪脾脏细胞面积（P<0.05），减少脾脏细胞数（P<0.05）；丁酸甘油酯使IUGR仔猪脾脏细胞面积增加（P<0.05），但减少了脾脏细胞数（P>0.05）；（3）与正常仔猪相比，IUGR仔猪血清中IGF-1的含量降低（P>0.05），而脾脏中IGF-1含量升高（P>0.05）；丁酸甘油酯能够提高IUGR仔猪血清、脾脏中IGF-1的含量（P>0.05）；（4）与正常仔猪相比，IUGR仔猪脾脏促炎症因子TNF-α、抗炎症因子IL-4含量升高（P>0.05）；而丁酸甘油酯可降低IUGR仔猪脾脏TNF-α、IL-4的含量（P>0.05）；（5）IUGR仔猪脾脏TNF-α mRNA的表达量高于正常仔猪（P>0.05），而丁酸甘油酯可显著降低IUGR仔猪脾脏TNF-α mRNA的表达量（P<0.05）；IUGR组IL-4 mRNA表达量高于对照组（P>0.05），而IT组低于IUGR组（P>0.05）；IUGR显著降低仔猪脾脏IGF-1 mRNA的表达量（P<0.05），丁酸甘油酯可使IUGR仔猪IGF-1 mRNA的表达量升高，但差异不显著；IUGR组Hsp60、Hsp70、Hsp90 mRNA的表达量高于对照组，其中Hsp60差异显著（P<0.05）；丁酸甘油酯可降低IUGR仔猪脾脏中这3种基因的表达量，其中Hsp60的表达差异显著（P<0.05）。结论：IUGR可损伤仔猪脾脏的发育及功能，丁酸甘油酯一定程度上能够缓解这种损伤。
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
关键字:丁酸甘油酯；IUGR；仔猪；脾脏；免疫
目录
摘要3
关键词3
Abstract3
Key words..4
引言.....4
1 材料与方法..........5
1.1 试验材料............5
1.2 试验设计 5
1.3 试验日粮配方.......5
1.4 饲养管理..............6
1.5 测定指标与方法......6
1.6 数据处理与统计..7
2 结果与分析8
2.1 丁酸甘油酯对IUGR仔猪体重、脾脏重量的影响...........8
2.2 丁酸甘油酯对IUGR仔猪脾脏显微结构的影响.......8
2.3 丁酸甘油酯对IUGR仔猪血清、脾脏中IGF-1含量的影响................8
2.4 丁酸甘油酯对IUGR仔猪脾脏细胞因子含量的影响................8
2.5 丁酸甘油酯对IUGR仔猪脾脏生长及免疫相关基因mRNA表达的影响..........9
3 讨论 9
3.1 日粮中添加丁酸甘油酯对IUGR仔猪体重、脾脏重量的影响.........9
3.2 日粮中添加丁酸甘油酯对IUGR仔猪脾脏显微结构的影响........................9
3.3 日粮中添加丁酸甘油酯对IUGR仔猪血清、肝脏中IGF-1的影响.................9
3.4 日粮中添加丁酸甘油酯对IUGR仔猪脾脏细胞因子含量的影响.....10
3.5 日粮中添加丁酸甘油酯对IUGR仔猪脾脏免疫相关基因表达的影响. *好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
........10
4 结论 11
致谢12
参考文献12
表1日粮配方及营养成分6
表2 丁酸甘油酯对IUGR仔猪体重、脾脏重量的影响 8
表3 丁酸甘油酯对IUGR仔猪脾脏显微结构的影响8
表4 丁酸甘油酯对IUGR仔猪血清、脾脏中IGF-1含量的影响8
表5 丁酸甘油酯对IUGR仔猪脾脏细胞因子含量的影响...8
表6 丁酸甘油酯对IUGR仔猪脾脏生长及免疫相关基因mRNA表达的影响9
丁酸甘油酯对IUGR仔猪生长及脾脏免疫功能的影响
引言
胎儿宫内发育迟缓（Intrauterine growth retardation, IUGR）是哺乳动物胎儿或其组织器官在母体妊娠期内的生长和发育障碍[1]。胎儿的生长发育是一个复杂的生物学过程，受遗传、环境、母体成熟度和其他因素的影响，上述因素影响子宫容量、胎盘大小和功能、子宫和胎盘间的血流、营养成分和氧气从母体到胎儿的运输、孕体对营养成分的利用率、胎儿的内分泌环境及代谢通路[2]。在临床上，遗传、胎盘功能异常、母体营养不良、不良的生活习惯（吸烟、饮酒）、疾病（高血压、心血管疾病、肾炎、糖尿病等）、感染及滥用药物等是IUGR发生的主要因素；在家畜生产上，子宫-胎盘血流量不足、胎盘功能异常、胎儿营养不足、母体营养过剩是IUGR发生的主要因素[3]。IUGR通常被认为是出生重低于相同孕龄正常胎儿出生重的10%[4]或低于相同孕龄平均体重的2个标准差[5]。
IUGR对人类和动物均造成不利影响。IUGR新生儿在围产期有更高的死亡率和发病率，并且在出生后有喂养困难、脂肪吸收率下降、患有消化系统疾病的倾向；另外IUGR会损伤肠道发育，影响营养物质的吸收与利用，导致肠道萎缩[6]。IUGR可导致新生儿器官不对称生长，红细胞增加，血红蛋白增加，促红细胞生成素增加，糖异生受抑制，肝糖元耗尽并且造成脂肪堆积，骨骼生长延迟，易造成窒息[7]。此外，研究发现IUGR婴儿在随后的生活中比正常婴儿更容易患心脏病和糖尿病[8] 。
IUGR在猪上很常见，几乎每窝都有1至2头低体重仔猪。IUGR在猪上的发生率为15%-20%[9]。据报道，IUGR仔猪出生重较正常仔猪低33%[10]。我国是养猪大国，2013年前三季度全国生猪出栏量1.73亿头，以IUGR发生率15%计算，IUGR仔猪约占2595万头，由于IUGR仔猪具有较高的死亡率和发病率，因此，IUGR对我国的养猪行业造成巨大损失。
近年来诸多研究表明，动物机体免疫系统的紊乱与IUGR的发生密切相关，而IUGR同样对动物免疫机能造成不同程度的损伤，影响动物机体的健康以及生长发育。鉴于当前家畜养殖生产高成本、集约化以及重大疫病频繁暴发的大环境，研究IUGR动物免疫器官的发育、功能及营养调控具有重大意义。
迄今为止，关于IUGR对新生儿免疫功能影响的研究，特别是对IUGR仔猪的研究仍十分缺乏。母体胎盘功能异常等因素导致的IUGR可损伤新生儿的体液免疫和细胞免疫，并对其日后的生长发育造成较大影响。据报道，IUGR可导致人类胸腺的萎缩[11]。此外，研究发现，IUGR婴儿的外周T淋巴细胞以及CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群的数量均少于正常儿[12-13]。林燕[14]等 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
报道，出生后第1天IUGR仔猪与正常仔猪的CD4+CD8+细胞占总T细胞的百分比差异显著，出生后第7天IUGR仔猪与正常仔猪的CD4细胞占总T细胞的百分比差异极显著。脾脏是动物机体最大的外周免疫器官，含有多种免疫活性细胞和细胞因子，是产生免疫应答及免疫效应物质的重要部位。脾实质由红髓、白髓、边缘区组成。红髓由脾索及脾血窦组成，是发生吞噬作用的主要场所；白髓由脾小体及动脉周围淋巴鞘组成，是发生特异性免疫应答的主要场所；边缘区是脾脏内首先接触抗原并引起免疫应答的部位。黄雪新[15]试验发现，IUGR仔猪脾中，参与免疫反应激活的细胞因子IL-1、IL-6和TNF含量显著提高，而抗炎细胞因子IL-2和IL-10降低，IL-4稍有升高，抗原及应激介导的脾免疫活性提高。
丁酸甘油酯是丁酸和甘油酯化后的产物，分子式为C16H26O6，存在于奶油、鱼肝油与汗液中，具有特殊的香味。丁酸甘油酯是有机丁酸盐，其有效成分是丁酸。丁酸是由结肠中的微生物发酵饲料纤维而产生的短链脂肪酸。据报道，丁酸盐能够维持肠道屏障功能，维持肠道微生物菌群平衡，改善胃肠道形态、促进消化吸收，参与免疫调节，并且具有神经保护、抗炎症、抑制癌症、抗氧化等作用。目前关于丁酸盐的研究主要针对肠道，而有关脾脏的报道极少。
本试验旨在研究IUGR对仔猪脾脏发育及功能的影响，并探究丁酸甘油酯对其的调控作用。
1 材料和方法
1.1 试验材料
试验材料：丁酸甘油酯（固态，含量为50%，糖衣酪蛋白包被，由厦门新奥公司提供）、BCA法蛋白定量测试试剂盒（南京建成）、猪血清IGF-1试剂盒（南京建成）、猪组织IGF-1试剂盒（南京建成）、猪组织TNF-α试剂盒（南京建成）、猪组织IL-4试剂盒（南京建成）、TAKARA反转录试剂盒、RT-PCR引物。
选取体重相近、预产期相近、同胎次的妊娠母猪20头，在其分娩当日，每窝新生仔猪（杜洛克×长白×大白）中选择1对或2对IUGR和正常体重（Normal body weight, NBW）仔猪（即1只NBW和1只IUGR或者2只NBW和2只IUGR），NBW仔猪中随机挑出8头设为NBW组，IUGR仔猪随机分为IUGR组和IT组。IUGR (BW 0.93±0.11kg) 和NBW (BW 1.67±0.13kg)。0至7日龄自然哺乳，7日龄断奶，开始饲喂试验配方奶，IT组在试验配方奶的基础上添加0.1%的丁酸甘油酯，饲喂至21日龄。21日龄时，每组随机挑选 6头，屠宰取样。
摘要：以“杜×长×大”三元杂交仔猪为研究对象，探讨丁酸甘油酯对IUGR仔猪生长及脾脏发育、免疫功能的影响。试验选取0d仔猪24头，分别设置对照组、试验组1与试验组2，每个处理设8个重复。对照组（正常出生体重，以下简称NBW）饲喂基础日粮，试验组1（IUGR组）基础日粮，试验组2（IUGR仔猪+丁酸甘油酯，以下简称IT组）饲喂基础日粮+0.10%丁酸甘油酯。21d时，每组选取6头仔猪进行屠宰取样，测定血清及脾脏中胰岛素样生长因子-1（IGF-1）含量，脾脏IGF-1、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素4（IL-4），脾脏IGF-1、TNF-α、IL-4、Hsp60、Hsp70、Hsp90 mRNA的表达。结果如下：（1）IUGR仔猪体重、脾脏重、脾脏指数显著低于正常仔猪（P<0.05），而丁酸甘油酯能够显著提高IUGR仔猪体重、脾脏重和脾脏指数（P<0.05）；（2）IUGR显著降低仔猪脾脏细胞面积（P<0.05），减少脾脏细胞数（P<0.05）；丁酸甘油酯使IUGR仔猪脾脏细胞面积增加（P<0.05），但减少了脾脏细胞数（P>0.05）；（3）与正常仔猪相比，IUGR仔猪血清中IGF-1的含量降低（P>0.05），而脾脏中IGF-1含量升高（P>0.05）；丁酸甘油酯能够提高IUGR仔猪血清、脾脏中IGF-1的含量（P>0.05）；（4）与正常仔猪相比，IUGR仔猪脾脏促炎症因子TNF-α、抗炎症因子IL-4含量升高（P>0.05）；而丁酸甘油酯可降低IUGR仔猪脾脏TNF-α、IL-4的含量（P>0.05）；（5）IUGR仔猪脾脏TNF-α mRNA的表达量高于正常仔猪（P>0.05），而丁酸甘油酯可显著降低IUGR仔猪脾脏TNF-α mRNA的表达量（P<0.05）；IUGR组IL-4 mRNA表达量高于对照组（P>0.05），而IT组低于IUGR组（P>0.05）；IUGR显著降低仔猪脾脏IGF-1 mRNA的表达量（P<0.05），丁酸甘油酯可使IUGR仔猪IGF-1 mRNA的表达量升高，但差异不显著；IUGR组Hsp60、Hsp70、Hsp90 mRNA的表达量高于对照组，其中Hsp60差异显著（P<0.05）；丁酸甘油酯可降低IUGR仔猪脾脏中这3种基因的表达量，其中Hsp60的表达差异显著（P<0.05）。结论：IUGR可损伤仔猪脾脏的发育及功能，丁酸甘油酯一定程度上能够缓解这种损伤。
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
关键字:丁酸甘油酯；IUGR；仔猪；脾脏；免疫
目录
摘要3
关键词3
Abstract3
Key words..4
引言.....4
1 材料与方法..........5
1.1 试验材料............5
1.2 试验设计 5
1.3 试验日粮配方.......5
1.4 饲养管理..............6
1.5 测定指标与方法......6
1.6 数据处理与统计..7
2 结果与分析8
2.1 丁酸甘油酯对IUGR仔猪体重、脾脏重量的影响...........8
2.2 丁酸甘油酯对IUGR仔猪脾脏显微结构的影响.......8
2.3 丁酸甘油酯对IUGR仔猪血清、脾脏中IGF-1含量的影响................8
2.4 丁酸甘油酯对IUGR仔猪脾脏细胞因子含量的影响................8
2.5 丁酸甘油酯对IUGR仔猪脾脏生长及免疫相关基因mRNA表达的影响..........9
3 讨论 9
3.1 日粮中添加丁酸甘油酯对IUGR仔猪体重、脾脏重量的影响.........9
3.2 日粮中添加丁酸甘油酯对IUGR仔猪脾脏显微结构的影响........................9
3.3 日粮中添加丁酸甘油酯对IUGR仔猪血清、肝脏中IGF-1的影响.................9
3.4 日粮中添加丁酸甘油酯对IUGR仔猪脾脏细胞因子含量的影响.....10
3.5 日粮中添加丁酸甘油酯对IUGR仔猪脾脏免疫相关基因表达的影响. *好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
........10
4 结论 11
致谢12
参考文献12
表1日粮配方及营养成分6
表2 丁酸甘油酯对IUGR仔猪体重、脾脏重量的影响 8
表3 丁酸甘油酯对IUGR仔猪脾脏显微结构的影响8
表4 丁酸甘油酯对IUGR仔猪血清、脾脏中IGF-1含量的影响8
表5 丁酸甘油酯对IUGR仔猪脾脏细胞因子含量的影响...8
表6 丁酸甘油酯对IUGR仔猪脾脏生长及免疫相关基因mRNA表达的影响9
丁酸甘油酯对IUGR仔猪生长及脾脏免疫功能的影响
引言
胎儿宫内发育迟缓（Intrauterine growth retardation, IUGR）是哺乳动物胎儿或其组织器官在母体妊娠期内的生长和发育障碍[1]。胎儿的生长发育是一个复杂的生物学过程，受遗传、环境、母体成熟度和其他因素的影响，上述因素影响子宫容量、胎盘大小和功能、子宫和胎盘间的血流、营养成分和氧气从母体到胎儿的运输、孕体对营养成分的利用率、胎儿的内分泌环境及代谢通路[2]。在临床上，遗传、胎盘功能异常、母体营养不良、不良的生活习惯（吸烟、饮酒）、疾病（高血压、心血管疾病、肾炎、糖尿病等）、感染及滥用药物等是IUGR发生的主要因素；在家畜生产上，子宫-胎盘血流量不足、胎盘功能异常、胎儿营养不足、母体营养过剩是IUGR发生的主要因素[3]。IUGR通常被认为是出生重低于相同孕龄正常胎儿出生重的10%[4]或低于相同孕龄平均体重的2个标准差[5]。
IUGR对人类和动物均造成不利影响。IUGR新生儿在围产期有更高的死亡率和发病率，并且在出生后有喂养困难、脂肪吸收率下降、患有消化系统疾病的倾向；另外IUGR会损伤肠道发育，影响营养物质的吸收与利用，导致肠道萎缩[6]。IUGR可导致新生儿器官不对称生长，红细胞增加，血红蛋白增加，促红细胞生成素增加，糖异生受抑制，肝糖元耗尽并且造成脂肪堆积，骨骼生长延迟，易造成窒息[7]。此外，研究发现IUGR婴儿在随后的生活中比正常婴儿更容易患心脏病和糖尿病[8] 。
IUGR在猪上很常见，几乎每窝都有1至2头低体重仔猪。IUGR在猪上的发生率为15%-20%[9]。据报道，IUGR仔猪出生重较正常仔猪低33%[10]。我国是养猪大国，2013年前三季度全国生猪出栏量1.73亿头，以IUGR发生率15%计算，IUGR仔猪约占2595万头，由于IUGR仔猪具有较高的死亡率和发病率，因此，IUGR对我国的养猪行业造成巨大损失。
近年来诸多研究表明，动物机体免疫系统的紊乱与IUGR的发生密切相关，而IUGR同样对动物免疫机能造成不同程度的损伤，影响动物机体的健康以及生长发育。鉴于当前家畜养殖生产高成本、集约化以及重大疫病频繁暴发的大环境，研究IUGR动物免疫器官的发育、功能及营养调控具有重大意义。
迄今为止，关于IUGR对新生儿免疫功能影响的研究，特别是对IUGR仔猪的研究仍十分缺乏。母体胎盘功能异常等因素导致的IUGR可损伤新生儿的体液免疫和细胞免疫，并对其日后的生长发育造成较大影响。据报道，IUGR可导致人类胸腺的萎缩[11]。此外，研究发现，IUGR婴儿的外周T淋巴细胞以及CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群的数量均少于正常儿[12-13]。林燕[14]等 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
报道，出生后第1天IUGR仔猪与正常仔猪的CD4+CD8+细胞占总T细胞的百分比差异显著，出生后第7天IUGR仔猪与正常仔猪的CD4细胞占总T细胞的百分比差异极显著。脾脏是动物机体最大的外周免疫器官，含有多种免疫活性细胞和细胞因子，是产生免疫应答及免疫效应物质的重要部位。脾实质由红髓、白髓、边缘区组成。红髓由脾索及脾血窦组成，是发生吞噬作用的主要场所；白髓由脾小体及动脉周围淋巴鞘组成，是发生特异性免疫应答的主要场所；边缘区是脾脏内首先接触抗原并引起免疫应答的部位。黄雪新[15]试验发现，IUGR仔猪脾中，参与免疫反应激活的细胞因子IL-1、IL-6和TNF含量显著提高，而抗炎细胞因子IL-2和IL-10降低，IL-4稍有升高，抗原及应激介导的脾免疫活性提高。
丁酸甘油酯是丁酸和甘油酯化后的产物，分子式为C16H26O6，存在于奶油、鱼肝油与汗液中，具有特殊的香味。丁酸甘油酯是有机丁酸盐，其有效成分是丁酸。丁酸是由结肠中的微生物发酵饲料纤维而产生的短链脂肪酸。据报道，丁酸盐能够维持肠道屏障功能，维持肠道微生物菌群平衡，改善胃肠道形态、促进消化吸收，参与免疫调节，并且具有神经保护、抗炎症、抑制癌症、抗氧化等作用。目前关于丁酸盐的研究主要针对肠道，而有关脾脏的报道极少。
本试验旨在研究IUGR对仔猪脾脏发育及功能的影响，并探究丁酸甘油酯对其的调控作用。
1 材料和方法
1.1 试验材料
试验材料：丁酸甘油酯（固态，含量为50%，糖衣酪蛋白包被，由厦门新奥公司提供）、BCA法蛋白定量测试试剂盒（南京建成）、猪血清IGF-1试剂盒（南京建成）、猪组织IGF-1试剂盒（南京建成）、猪组织TNF-α试剂盒（南京建成）、猪组织IL-4试剂盒（南京建成）、TAKARA反转录试剂盒、RT-PCR引物。
选取体重相近、预产期相近、同胎次的妊娠母猪20头，在其分娩当日，每窝新生仔猪（杜洛克×长白×大白）中选择1对或2对IUGR和正常体重（Normal body weight, NBW）仔猪（即1只NBW和1只IUGR或者2只NBW和2只IUGR），NBW仔猪中随机挑出8头设为NBW组，IUGR仔猪随机分为IUGR组和IT组。IUGR (BW 0.93±0.11kg) 和NBW (BW 1.67±0.13kg)。0至7日龄自然哺乳，7日龄断奶，开始饲喂试验配方奶，IT组在试验配方奶的基础上添加0.1%的丁酸甘油酯，饲喂至21日龄。21日龄时，每组随机挑选 6头，屠宰取样。
版权保护: 本文由 hbsrm.com编辑，转载请保留链接: www.hbsrm.com/yxlw/dwyx/1070.html
