cta1vp1ghloopdd蛋白的表达及免疫原性的初步判断
通过基因合成的方法人工合成重组蛋白基因序列CTA1-VP1 GHloop-DD，将合成的基因序列连接进入表达载体PET32a，将重组蛋白表达载体转化到大肠杆菌BL21中通过IPTG诱导蛋白质表达，表达细胞经超声破碎后，通过SDS-PAGE电泳检测，结果表明蛋白大小约为43kD，并且表达于上清中。经western-blot鉴定，重组蛋白能与霍乱毒素一抗反应，说明重组蛋白具有霍乱毒素的免疫学活性，重组蛋白CTA1-VP1 GHloop-DD经镍柱纯化，透析脱盐后皮下免疫小鼠，结果表明重组蛋白CTA1-VP1 GHloop-DD能诱导小鼠产生特异性抗口蹄疫病毒的免疫应答，加入免疫增强剂后效果更好。上述研究成果为研制新型口蹄疫疫苗提供了思路。
目录
摘要 2
关键词 2
Abstract 2
Key words 2
引言 2
1 材料与方法 3
1.1 材料 3
1.1.1 菌株与载体 3
1.1.2 主要试剂 3
1.1.2 实验动物 4
1.1.3 实验主要仪器 4
1.2 重组蛋白表达质粒PETCTA1VP1 GH LOOPDD的构建 4
1.2.1 PETCTA1VP1 GH LOOPDD重组质粒的连接 4
1.2.2 BL21感受态细胞的制备 4
1.2.3 连接产物转化宿主菌 4
1.3 CTA1VP1 GHoopDD蛋白的诱导表达 5
1.3.1重组质粒的转化及转化菌的诱导 5
1.3.2 CTA1VP1 GHoopDD重组蛋白的westernblot分析 5
1.4 CTA1VP1 GHoopDD重组蛋白的纯化 5
1.5 CTA1VP1 GHoopDD重组蛋白透析及蛋白浓度测定 5
1.6 小鼠免疫实验 5
1.6.1 疫苗接种 5
1.6.2 小鼠血清抗体效价检测 5
2 结果与分析 6
2.1 CTA1VP1 GHloopDD表达质粒的构建结果 6
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DD重组蛋白的诱导表达 6
2.3 CTA1VP1 GHloopDD重组蛋白的Westernblot分析 7
2.4 CTA1VP1 GHloopDD重组蛋白的纯化及蛋白浓度的测定 7
2.5 免疫小鼠血清的抗体水平测定 7
讨论 8
致谢 9
参考文献 9
CTA1VP1 GHloopDD蛋白的表达及免疫原性的初步判断
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摘要 2
关键词 2
Abstract 2
Key words 2
引言 2
1 材料与方法 3
1.1 材料 3
1.1.1 菌株与载体 3
1.1.2 主要试剂 3
1.1.2 实验动物 4
1.1.3 实验主要仪器 4
1.2 重组蛋白表达质粒PETCTA1VP1 GH LOOPDD的构建 4
1.2.1 PETCTA1VP1 GH LOOPDD重组质粒的连接 4
1.2.2 BL21感受态细胞的制备 4
1.2.3 连接产物转化宿主菌 4
1.3 CTA1VP1 GHoopDD蛋白的诱导表达 5
1.3.1重组质粒的转化及转化菌的诱导 5
1.3.2 CTA1VP1 GHoopDD重组蛋白的westernblot分析 5
1.4 CTA1VP1 GHoopDD重组蛋白的纯化 5
1.5 CTA1VP1 GHoopDD重组蛋白透析及蛋白浓度测定 5
1.6 小鼠免疫实验 5
1.6.1 疫苗接种 5
1.6.2 小鼠血清抗体效价检测 5
2 结果与分析 6
2.1 CTA1VP1 GHloopDD表达质粒的构建结果 6
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DD重组蛋白的诱导表达 6
2.3 CTA1VP1 GHloopDD重组蛋白的Westernblot分析 7
2.4 CTA1VP1 GHloopDD重组蛋白的纯化及蛋白浓度的测定 7
2.5 免疫小鼠血清的抗体水平测定 7
讨论 8
致谢 9
参考文献 9
CTA1VP1 GHloopDD蛋白的表达及免疫原性的初步判断
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