猪圆环病毒2型NJ株Cap蛋白的原核表达与鉴定

猪圆环病毒2型NJ株Cap蛋白的原核表达与鉴定[20200507183013]
摘要:根据GenBank 公布的PCV- 2 ORF2 基因的核苷酸序列, 设计并合成1 对特异性引物, 应用PCR 方法扩增PCV- 2 NJ株ORF2 全长基因, 将其克隆入pMD19-T载体中, 进行测序及序列分析。将ORF2基因克隆到原核表达载体pQZ中,经ITPG诱导,成功表达ORF2 基因编码的结构蛋白。SDS-PAGE分析显示,表达的重组蛋白分子量为28KDa,与设计相符。western-blotting分析表明,重组蛋白能可以被PCV2阳性血清识别。
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关键字:猪圆环病毒;Cap基因;原核表达;免疫印迹
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words 1
引言(或绪论)1
1 材料与方法1
1.1 材料1
1.1.1病毒、菌种与质粒 1
1.1.2主要试剂 2
1.1.3主要仪器 2
1.2 方法2
1.2.1引物设计与合成 2
1.2.2从PCV-2 NJ株基因组DNA 的提取2
1.2.3 PCR扩增 2
1.2.4 PCV-2NJ株ORF2基因PCR扩增产物的纯化与回收2
1.2.5重组表达质粒的构建与鉴定 3
1.2.6重组质粒在大肠杆菌中的诱导表达 3
1.2.7 表达产物的western-blotting 4
2 结果与分析 4
2.1 PCR扩增4
2.2重组质粒pQZ-Cap2α的鉴定 5
2.3 SDS-PAGE 分析 6
2.4重组蛋白的western-blotting分析 6
3 讨论6
3.1研究意义6
3.2本实验后续工作6
3.2.1目的片段的优化和合成7
3.2.2宿主细胞的选择8
致谢8
参考文献8
猪圆环病毒2型NJ株Cap 蛋白的原核表达与鉴定
动物药学 纪鹏

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