黄芩解毒散预防仔猪腹泻应用研究
黄芩解毒散预防仔猪腹泻应用研究[20200507190412]
摘要：选取25日龄断奶仔猪186头，随机分为6组。高、中、低剂量的药物试验组分别在饲料中添加0.2％、0.1％和0.05％的黄芩解毒散，药物对照组分别添加100mg/kg的氟苯尼考、100mg/kg硫酸粘菌素，阳性对照组不添加任何药物。各组连续处理14天，每天观察记录猪群精神、采食、粪便及腹泻发生等情况，至停药后2周统计各组腹泻的发生率，同时进行抑菌试验，结果显示，黄芩解毒散对大肠杆菌，沙门氏菌等高度敏感，高剂量组的发病率最低，其次为中剂量组和药物对照组，这4组显著高于阳性对照组，4组之间差异不显著。表明黄芩解毒散与抗生素效果相当，可以有效预防仔猪腹泻，推荐剂量为0.1%混饲给药，连用14天。
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关键字:黄芩解毒散；仔猪腹泻；预防
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words 1
引言1
1 材料与方法1
1.1 试验材料2
1.2 试验方法2
1.2.1 预防仔猪腹泻试验方法2
1.2.2 黄芩解毒散抑菌试验方法3
1.3测定指标3
1.3.1 预防仔猪腹泻测定指标3
1.3.2 抑菌试验判定标准3
2 结果与分析3
2.1预防仔猪腹泻试验结果分析3
2.2抑菌试验结果分析4
3 讨论4
3.1试验结果分析4
3.2仔猪腹泻病现状5
3.3 仔猪腹泻机理5
3.4 肠道菌群作用5
3.5 中药替代抗生素探讨5
致谢6
参考文献7
黄芩解毒散预防仔猪腹泻的应用研究
引言
仔猪腹泻是一种发病率高、死亡率高的多因素性疾病，其病因复杂且一旦一头仔猪发病，常可导致群体仔猪发病。仔猪腹泻可导致仔猪机体抗病力下降、生长速度缓慢、饲料利用率降低等，还可继发其他感染，增加疾病的多因素性和不可控性。因此对养猪业的危害很大，严重影响了养殖场及养殖户的的经济效益。对于仔猪腹泻的预防和治疗，大多数养殖场及散养户都是使用化药、抗生素、抗菌素等，虽然能有效控制病情，但是也伴随了诸多耐药性的问题以及药物对动物机体的不良影响。有学者提出利用转基因技术开展猪抗病育种研究，开发出抗腹泻病转基因猪抗病新品种[1]，以提高疾病控制水平，有效控制这种疾病。但考虑到中国养殖业的现状、转基因猪的难度、成本、收益，这对大多是养殖场还是无法普及的。
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然而，经过数千年发展而形成的具有独特理论体系和丰富诊疗手段的中兽医学，蕴含了古人长期医疗实践的总结，博大而精深。中药在国内外的发展也被日益看重。鉴于中药相对化药而言无滥用而产生的耐药性、合理配伍对机体毒副作用小或无毒性、治根治本等特点，中药在未来的发展是大势所趋。中药在治疗胃肠道疾病时具有化药无法取代的优势，世界卫生组织( WTO) 呼吁利用传统医药来预防和治疗腹泻等相关疾病[2]。
目前，许多兽药企业正在努力往中药方向研发，黄芩解毒散是无锡正大畜禽有限公司将传统秘方与现代中药提取技术相结合，通过长达10年联合中国药科大学，大学等共同研发而成，已获得国家三类新兽药证书、高新技术产品证书等。其主要成分是黄芩、女贞子、铁苋菜、马齿苋等天然植物萃取精华，其中的黄芩更是被誉为植物抗生素。黄芩解毒散能够整体提升肠道水平，保证肠道良好的内环境稳态、良好的消化吸收转运功能以及完善的肠粘膜免疫。本试验试图进行该药和氟苯尼考、硫酸黏菌素等抗生素药物预防仔猪腹泻效果的对比试验。
1 材料与方法
1.1 试验材料
黄芩解毒散，规格：100g/包；批号：20121207；
纳米氟苯尼考粉，规格：100g/包；批号：20121208；
硫酸粘菌素预混剂，规格：100g/包；批号：20121207；均由无锡正大畜禽有限公司实验室提供。
培养基：牛肉膏蛋白胨固体培养基，市售。
菌种：猪大肠杆菌、鸡大肠杆菌、猪沙门氏菌、猪魏氏梭菌，由南通市通州区横马养猪场提供。
其他：牛津杯、培养皿、酒精棉、酒精灯、涂布器、移液枪、1ml、200ul枪头、恒温培养箱、超净工作台、接种环，由无锡正大畜禽有限公司实验室提供。
1.2 试验方法
1.2.1 试验动物分组及处理
南通市通州区横马养猪场25日龄杜-大-长断奶仔猪，挑选体重相近，体质均一的断奶仔猪186头随机分为6组，每组31头。高、中、低剂量的药物试验组，在基础日粮（表1）中分别添加0.2%、0.1%和0.05%的黄芩解毒散，药物对照组分别在基础日粮中添加100mg/kg的氟苯尼考和100mg/kg硫酸粘菌素；阳性对照组，不添加任何药物。各组连续处理14天。
表1 仔猪基础日粮配方
Table I Piglet basal diet recipes
配 料 比例（％） 营 养 含 量
预混料 4.0 蛋 白 ≥18.4％
玉 米 61.0 热 量 ≥3290ka
豆 粕 20.0 粗纤维 4.07％
膨化大豆 8.0 氨基酸 1.13
碳酸氢钙 0.3 钙 0.67
代乳粉 5.0 磷 0.46
米 糠 1.7
1.2.2 抑菌试验方法
按照试验菌的不同分为A、B、C、D四组，A组为猪大肠杆菌、B组为鸡大肠杆菌、C组为猪沙门氏菌、D组为猪魏氏梭菌。各组分别进行0.1%黄芩解毒散、100mg/kg氟苯尼考以及100mg/kg硫酸黏菌素的抑菌试验，每组试验设4个重复。试验步骤如下：
倒平板：将已灭菌的琼脂培养基加热到完全融化，倒在培养基皿内 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: %3^5`1^9`1^6^0`7^2#
，每皿约20ml,凝固。
标记：菌种、牛津杯摆放位置、药物及其浓度。
制备菌悬液：用生理盐水洗下试管内的菌苔并稀释。
菌夜涂布：吸取菌液1ml入平板表面，用涂布器将菌液涂布均匀。
摆放牛津杯： 在各组培养基表面垂直摆放牛津杯，轻轻加压，使其与培养基接触无空隙，每个培养基皿中放置4个牛津杯。
加入待检药液：每组在杯中各加入200ul 0.1%黄芩解毒散以及100mg/kg氟苯尼考、100mg/kg硫酸黏菌素以及生理盐水对照组。
孵育：加满后在37℃培养16~18h，观察结果。
1.3 测定指标
1.3.1 预防仔猪腹泻测定指标
每天观察、记录猪群的精神状态、采食量、粪便、腹泻发生及死亡等情况，至停药后2周统计各组腹泻的发生率。腹泻率=试验期腹泻仔猪头次/（试验仔猪头数×试验天数）×100%
1.3.2 抑菌试验判定标准
在培养中,一方面试验菌开始生长，另一方面试验药物呈球面扩散，离杯越近，药物浓度越大，离杯越远药物浓度越小。随着药物浓度减小，有一条最低抑菌浓度带，在带范围内，菌不能生长，而呈透明的圆圈，这就叫“抑菌圈”。药物浓度越高，抑菌圈 越大。用游标卡尺量取抑菌圈直径，测量平均值，进行对比研究。抑菌直径≥20mm为极敏感“+ + +”；15mm≤抑菌直径＜20mm为高敏“+ +”；10mm≤抑菌直径＜15mm为中敏“+”；抑菌直径＜10mm为低敏或无效“—”。
2 结果与分析
2.1 预防仔猪腹泻
至停药后2周，阳性对照组仔猪腹泻的发病率最高，其次为黄芩解毒散低剂量组；黄芩解毒散高剂量组仔猪腹泻的发病率最低，其次为黄芩解毒散中剂量组和氟苯尼考、硫酸黏菌素等抗生素对照组，这4组显著高于阳性对照组（P＜0.05)，3组之间的差异不显著（表2）。
摘要：选取25日龄断奶仔猪186头，随机分为6组。高、中、低剂量的药物试验组分别在饲料中添加0.2％、0.1％和0.05％的黄芩解毒散，药物对照组分别添加100mg/kg的氟苯尼考、100mg/kg硫酸粘菌素，阳性对照组不添加任何药物。各组连续处理14天，每天观察记录猪群精神、采食、粪便及腹泻发生等情况，至停药后2周统计各组腹泻的发生率，同时进行抑菌试验，结果显示，黄芩解毒散对大肠杆菌，沙门氏菌等高度敏感，高剂量组的发病率最低，其次为中剂量组和药物对照组，这4组显著高于阳性对照组，4组之间差异不显著。表明黄芩解毒散与抗生素效果相当，可以有效预防仔猪腹泻，推荐剂量为0.1%混饲给药，连用14天。
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关键字:黄芩解毒散；仔猪腹泻；预防
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words 1
引言1
1 材料与方法1
1.1 试验材料2
1.2 试验方法2
1.2.1 预防仔猪腹泻试验方法2
1.2.2 黄芩解毒散抑菌试验方法3
1.3测定指标3
1.3.1 预防仔猪腹泻测定指标3
1.3.2 抑菌试验判定标准3
2 结果与分析3
2.1预防仔猪腹泻试验结果分析3
2.2抑菌试验结果分析4
3 讨论4
3.1试验结果分析4
3.2仔猪腹泻病现状5
3.3 仔猪腹泻机理5
3.4 肠道菌群作用5
3.5 中药替代抗生素探讨5
致谢6
参考文献7
黄芩解毒散预防仔猪腹泻的应用研究
引言
仔猪腹泻是一种发病率高、死亡率高的多因素性疾病，其病因复杂且一旦一头仔猪发病，常可导致群体仔猪发病。仔猪腹泻可导致仔猪机体抗病力下降、生长速度缓慢、饲料利用率降低等，还可继发其他感染，增加疾病的多因素性和不可控性。因此对养猪业的危害很大，严重影响了养殖场及养殖户的的经济效益。对于仔猪腹泻的预防和治疗，大多数养殖场及散养户都是使用化药、抗生素、抗菌素等，虽然能有效控制病情，但是也伴随了诸多耐药性的问题以及药物对动物机体的不良影响。有学者提出利用转基因技术开展猪抗病育种研究，开发出抗腹泻病转基因猪抗病新品种[1]，以提高疾病控制水平，有效控制这种疾病。但考虑到中国养殖业的现状、转基因猪的难度、成本、收益，这对大多是养殖场还是无法普及的。
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: %3^5`1^9`1^6^0`7^2#
然而，经过数千年发展而形成的具有独特理论体系和丰富诊疗手段的中兽医学，蕴含了古人长期医疗实践的总结，博大而精深。中药在国内外的发展也被日益看重。鉴于中药相对化药而言无滥用而产生的耐药性、合理配伍对机体毒副作用小或无毒性、治根治本等特点，中药在未来的发展是大势所趋。中药在治疗胃肠道疾病时具有化药无法取代的优势，世界卫生组织( WTO) 呼吁利用传统医药来预防和治疗腹泻等相关疾病[2]。
目前，许多兽药企业正在努力往中药方向研发，黄芩解毒散是无锡正大畜禽有限公司将传统秘方与现代中药提取技术相结合，通过长达10年联合中国药科大学，大学等共同研发而成，已获得国家三类新兽药证书、高新技术产品证书等。其主要成分是黄芩、女贞子、铁苋菜、马齿苋等天然植物萃取精华，其中的黄芩更是被誉为植物抗生素。黄芩解毒散能够整体提升肠道水平，保证肠道良好的内环境稳态、良好的消化吸收转运功能以及完善的肠粘膜免疫。本试验试图进行该药和氟苯尼考、硫酸黏菌素等抗生素药物预防仔猪腹泻效果的对比试验。
1 材料与方法
1.1 试验材料
黄芩解毒散，规格：100g/包；批号：20121207；
纳米氟苯尼考粉，规格：100g/包；批号：20121208；
硫酸粘菌素预混剂，规格：100g/包；批号：20121207；均由无锡正大畜禽有限公司实验室提供。
培养基：牛肉膏蛋白胨固体培养基，市售。
菌种：猪大肠杆菌、鸡大肠杆菌、猪沙门氏菌、猪魏氏梭菌，由南通市通州区横马养猪场提供。
其他：牛津杯、培养皿、酒精棉、酒精灯、涂布器、移液枪、1ml、200ul枪头、恒温培养箱、超净工作台、接种环，由无锡正大畜禽有限公司实验室提供。
1.2 试验方法
1.2.1 试验动物分组及处理
南通市通州区横马养猪场25日龄杜-大-长断奶仔猪，挑选体重相近，体质均一的断奶仔猪186头随机分为6组，每组31头。高、中、低剂量的药物试验组，在基础日粮（表1）中分别添加0.2%、0.1%和0.05%的黄芩解毒散，药物对照组分别在基础日粮中添加100mg/kg的氟苯尼考和100mg/kg硫酸粘菌素；阳性对照组，不添加任何药物。各组连续处理14天。
表1 仔猪基础日粮配方
Table I Piglet basal diet recipes
配 料 比例（％） 营 养 含 量
预混料 4.0 蛋 白 ≥18.4％
玉 米 61.0 热 量 ≥3290ka
豆 粕 20.0 粗纤维 4.07％
膨化大豆 8.0 氨基酸 1.13
碳酸氢钙 0.3 钙 0.67
代乳粉 5.0 磷 0.46
米 糠 1.7
1.2.2 抑菌试验方法
按照试验菌的不同分为A、B、C、D四组，A组为猪大肠杆菌、B组为鸡大肠杆菌、C组为猪沙门氏菌、D组为猪魏氏梭菌。各组分别进行0.1%黄芩解毒散、100mg/kg氟苯尼考以及100mg/kg硫酸黏菌素的抑菌试验，每组试验设4个重复。试验步骤如下：
倒平板：将已灭菌的琼脂培养基加热到完全融化，倒在培养基皿内 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: %3^5`1^9`1^6^0`7^2#
，每皿约20ml,凝固。
标记：菌种、牛津杯摆放位置、药物及其浓度。
制备菌悬液：用生理盐水洗下试管内的菌苔并稀释。
菌夜涂布：吸取菌液1ml入平板表面，用涂布器将菌液涂布均匀。
摆放牛津杯： 在各组培养基表面垂直摆放牛津杯，轻轻加压，使其与培养基接触无空隙，每个培养基皿中放置4个牛津杯。
加入待检药液：每组在杯中各加入200ul 0.1%黄芩解毒散以及100mg/kg氟苯尼考、100mg/kg硫酸黏菌素以及生理盐水对照组。
孵育：加满后在37℃培养16~18h，观察结果。
1.3 测定指标
1.3.1 预防仔猪腹泻测定指标
每天观察、记录猪群的精神状态、采食量、粪便、腹泻发生及死亡等情况，至停药后2周统计各组腹泻的发生率。腹泻率=试验期腹泻仔猪头次/（试验仔猪头数×试验天数）×100%
1.3.2 抑菌试验判定标准
在培养中,一方面试验菌开始生长，另一方面试验药物呈球面扩散，离杯越近，药物浓度越大，离杯越远药物浓度越小。随着药物浓度减小，有一条最低抑菌浓度带，在带范围内，菌不能生长，而呈透明的圆圈，这就叫“抑菌圈
2 结果与分析
2.1 预防仔猪腹泻
至停药后2周，阳性对照组仔猪腹泻的发病率最高，其次为黄芩解毒散低剂量组；黄芩解毒散高剂量组仔猪腹泻的发病率最低，其次为黄芩解毒散中剂量组和氟苯尼考、硫酸黏菌素等抗生素对照组，这4组显著高于阳性对照组（P＜0.05)，3组之间的差异不显著（表2）。
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