猪肺炎支原体168株不同代次免疫原性鉴定

:为了比较并确定猪肺炎支原体168株F320s与F350s的安全性与免疫原性,采用江苏省农科院兽医所研制的猪肺炎支原体168株F327及猪肺炎支原体168株F352,免疫10-15日龄猪肺炎支原体阴性健康仔猪(猪肺炎支原体sIgA抗体阴性)。于免疫后28、42天以及攻毒后28天,每头猪采血1ml,分离血清,ELISA法检测血清样品中猪肺炎支原体特异性IgG抗体滴度。于免疫后0、3、7、14、21、28、35和42天,以及攻毒后7、14、21、28天采集鼻拭子,检测猪肺炎支原体特异性SIgA抗体滴度。结果显示F352株和F327株均能显著提高猪肺炎支原体特异性IgG抗体滴度和SIgA抗体滴度,F352株IgG和SIgA水平均高于F327株,显示了良好的免疫效果及攻毒保护效果。
目录
摘要3
关键词3
Abstract3
Key words3
引言3
1 材料与方法4
1.1 材料 4
1.1.1 菌株 4
1.1.2 动物 4
1.1.3 动物饲料 4
1.1.4 实验仪器及设备 5
1.2 方法 5
1.2.1 动物分组及处理5
1.2.2 动物临床症状观察与记录 6
1.2.3 攻毒 6
1.2.4 攻毒后观察6
1.2.5 攻毒后剖检 6
1.2.6 动物采样及检测 6
1.2.7 数据处理 7
2 结果7
2.1 疫苗对体温的影响7
2.2 疫苗对SIgA的影响7
2.3 疫苗对血清IgG的影响 8
2.4 动物剖检变化 9
3 讨论 10
3.1 猪支原体肺炎弱毒活疫苗可有效激发机体的局部黏膜免疫10
3.2 猪支原体肺炎弱毒活疫苗可以通过占位效应阻止野毒的感染10
3.3 接种弱毒疫苗168株可使血清中IgG水平升高11
3.4 168株不同代次疫苗的效力比较11
致谢11
参考文献12
猪肺炎支原体16
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8株不同代次免疫原性鉴定
动物医学院学生 陈茜
江苏省农业科学院兽医研究所 冯志新
引言
猪支原体肺炎(Mycoplasma pneumonia of swine,MPS)是由猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)引起的一种慢性、接触性、呼吸道传染病,又称猪地方流行性肺炎[1]。临床上以咳嗽、气喘和肺部典型的“虾肉”样病变为特征,发病率高,死亡率低。猪肺炎支原体常与其他细菌和病毒混合感染,引起猪地方性肺炎(Enzootic pneumonia,EP)和猪呼吸道病综合征(Porcine respiratory disease complex,PRDC)。据我国部分省市规模化养猪场血清学检验,阳性率30%~50%,产生极大的经济损失[23]。由于带菌病猪的存在和分布面较广,除直接发生死亡外,病猪生长发育缓慢,生长率降低15%左右,饲料利用率降低20%,造成饲料和人力的浪费。
猪肺炎支原体常通过病猪与健康猪接触或通过飞沫经空气传播,广泛流行于世界各养猪国家和地区,是一种顽固性慢性传染病,药物治疗效果不够理想,停药后容易复发,并且该病一旦在猪场流行,就很难根除[4]。因此,预防、控制和净化猪气喘病须采取早期诊断、及时隔离、抗生素治疗或淘汰病猪、疫苗预防、全进全出、严格消毒等综合性措施,其中疫苗预防起着关键性作用。
目前,市场上可供选择的疫苗主要为进口灭活疫苗和国产弱毒疫苗。研究表明,猪体全身的细胞免疫和局部的黏膜免疫机制对抵抗并清除猪肺炎支原体的感染起着关键的作用[58]。猪支原体肺炎活疫苗(168株)是当前国内唯一大量推广使用的弱毒疫苗,临床使用效果显著。本试验通过攻毒测试肺内免疫后的免疫保护效力,比较并确定猪肺炎支原体168株F320s与F350s的安全性与免疫原性,为临床研制出新型的抗猪支原体性肺炎疫苗提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1菌株
猪肺炎支原体168株F327:由江苏省农科院兽医所实验室自制,20℃冻干保存,2ml/瓶,CCU为107CCU/ml,制备时间为2015年8月7日,批号20150807。套式PCR鉴定:Mhp阳性,Mhr阴性。
猪肺炎支原体168株F352:由江苏省农科院兽医所实验室自制,40℃冻干保存,0.5ml/瓶,CCU为107CCU/ml,制备时间为2012年4月26日,批号20120426。套式PCR鉴定:Mhp阳性,Mhr阴性。
1.1.2 动物
1015日龄猪肺炎支原体阴性健康仔猪(猪肺炎支原体sIgA抗体阴性),由南京洲邦生物科技有限公司提供。
免疫状况:未免疫气喘病疫苗。
饲养状况:自由饮水和采食。饲料不含抗支原体的抗生素。
实验时间:2015年9月23日2015年12月2日。
1.1.3 动物饲料
由宿迁大北农饲料有限公司提供的无抗仔猪料,饲料的具体配比及营养成分见表1。
表1 饲料营养成分及配比
原料名称
用量(kg)
大北农核心料
2.18%
膨化玉米
27%
膨化大豆
15%
豆粕(46)
15%
乳清粉
5%
面粉
7%
饼干粉
13%
蔗糖
4%
大豆蛋白粉
4%
磷酸二氢钙
1.2%
石粉
1.1%
微生态制剂
0.02%
氨基酸
1.2%
微量添加剂
1.3%
进口鱼粉
3%
合计
100%
1.1.4 实验仪器及设备
酶联免疫仪(DG3022型,中国华东电子管厂生产)、注射器(2、5、10ml)、耳标、耳号钳、棉签、冰盒、相机、解剖器械、离心管。
1.2方法
1.2.1动物分组及处理
动物分组及处理情况见表2。
表2 动物分组及处理
组别
G1
G2
G3

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好棒文