马链球菌兽疫亚种sagA基因缺失株的构建
马链球菌兽疫亚种sagA基因缺失株的构建[20200507185827]
摘要：以马链球菌兽疫亚种ATCC35246株为模板，分别扩增溶血素S合成蛋白A（sagA）基因的883 bp、780 bp的上下游同源臂，将两者融合之后与自杀性质粒pSET4S质粒进行连接，将连接产物转化入DH5α感受态细胞中，构建了基因缺失载体pSET4sΔsagA。然后将构建的载体pSET4sΔsagA通过电转化导入ATCC35246的感受态细胞中，利用壮观霉素抗性进行初步筛选，并用PCR进行鉴定，以期构建sagA基因缺失株ATCC35246（ΔsagA），为进一步研究马链球菌溶血素的功能奠定基础。
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: %3^5`1^9`1^6^0`7^2#
关键字:马链球菌兽疫亚种；溶血素S合成蛋白A；基因缺失
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料与方法2
1.1材料 2
1.1.1菌种及质粒 2
1.1.2主要试剂 3
1.2 细菌培养 3
1.3细菌基因组DNA提取3
1.4基因缺失质粒的构建3
1.4.1引物设计3
1.4.2 PCR反应体系3
1.4.3 PCR 条件3
1.4.4琼脂糖电泳3
1.4.5 PCR扩増产物的回收 3
1.4.6 融合PCR4
1.4.7 PCR扩增产物的回收4
1.4.8基因缺失质粒的构建过程4
1.4.9 化学转化4
1.4.10 基因缺失质粒的鉴定 4
1.5基因缺失株的构建 4
1.5.1感受态细胞的制备4
1.5.2电转化5
1.5.3 ATCC35246（?sagA）的筛选5
1.5.3.1挑单菌落传代5
1.5.3.2对挑5
1.5.3.3 PCR 鉴定5
2结果与分析5
2.1基因缺失质粒的构建 5
2.2 ATCC35246(?sagA)的筛选和鉴定6
3讨论6
致谢7
参考文献7马链球菌兽疫亚种sagA基因缺失株的构建
摘要：以马链球菌兽疫亚种ATCC35246株为模板，分别扩增溶血素S合成蛋白A（sagA）基因的883 bp、780 bp的上下游同源臂，将两者融合之后与自杀性质粒pSET4S质粒进行连接，将连接产物转化入DH5α感受态细胞中，构建了基因缺失载体pSET4sΔsagA。然后将构建的载体pSET4sΔsagA通过电转化导入ATCC35246的感受态细胞中，利用壮观霉素抗性进行初步筛选，并用PCR进行鉴定，以期构建sagA基因缺失株ATCC35246（ΔsagA），为进一步研究马链球菌溶血素的功能奠定基础。
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关键字:马链球菌兽疫亚种；溶血素S合成蛋白A；基因缺失
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摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料与方法2
1.1材料 2
1.1.1菌种及质粒 2
1.1.2主要试剂 3
1.2 细菌培养 3
1.3细菌基因组DNA提取3
1.4基因缺失质粒的构建3
1.4.1引物设计3
1.4.2 PCR反应体系3
1.4.3 PCR 条件3
1.4.4琼脂糖电泳3
1.4.5 PCR扩増产物的回收 3
1.4.6 融合PCR4
1.4.7 PCR扩增产物的回收4
1.4.8基因缺失质粒的构建过程4
1.4.9 化学转化4
1.4.10 基因缺失质粒的鉴定 4
1.5基因缺失株的构建 4
1.5.1感受态细胞的制备4
1.5.2电转化5
1.5.3 ATCC35246（?sagA）的筛选5
1.5.3.1挑单菌落传代5
1.5.3.2对挑5
1.5.3.3 PCR 鉴定5
2结果与分析5
2.1基因缺失质粒的构建 5
2.2 ATCC35246(?sagA)的筛选和鉴定6
3讨论6
致谢7
参考文献7马链球菌兽疫亚种sagA基因缺失株的构建
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