姜黄素对免疫应激断奶仔猪血清和肝脏脂代谢的影响
摘 要本试验旨在研究姜黄素对免疫应激断奶仔猪血清和肝脏脂肪代谢的影响。选用断奶日龄为28 日的仔猪（杜×长×大）24头，分为N、NL和CL3组，每组8个重复，每个重复1头。N、NL组饲喂基础日粮，CL组饲喂基础日粮+200 mg/kg姜黄素。试验第18、28 d，对NL、CL组腹腔注射100 μg/kg BW LPS。采集血液和肝脏样品，分析脂代谢指标及相关基因的表达。结果表明NL组血清ALT和AST含量相对N组升高，CL组ALT含量比NL组降低16.07%。NL组血清和肝脏中甘油三酯含量均高于N组，CL组血清和肝脏甘油三酯含量相比NL组降低。添加姜黄素显著降低仔猪肝脏FAS mRNA的表达(P＜0.05)，但对ACCβ、SREBP-1基因表达量影响不显著(P>0.05)。总之，姜黄素可调节肝脏脂代谢，缓解免疫应激诱导的脂代谢紊乱。
目录
摘 要 1
关键词 1
Abstract 1
Key words 1
引言 1
1 材料与方法 2
1.1 试验设计与动物的选择 2
1.2 饲养管理 2
1.3 样品采集 2
1.4 测定指标方法 2
1.4.1 血清指标检测方法 2
1.4.2 肝脏指标及检测方法 2
1.4.3 肝脏脂肪合成相关基因表达 3
1.5 数据处理与统计 3
2 结果与分析 4
2.1 姜黄素对断奶仔猪血清相关指标的影响 4
2.1.1 姜黄素对断奶仔猪血清AST和ALT指标的影响 4
2.1.2 姜黄素对断奶仔猪血清脂质代谢指标的影响 4
2.2 姜黄素对断奶仔猪肝脏相关指标的影响 4
2.2.1 姜黄素对断奶仔猪肝脏AST和ALT指标的影响 4
2.2.2 姜黄素对断奶仔猪肝脏脂质代谢指标的影响 4
2.2.3 姜黄素对断奶仔猪肝脏脂肪合成相关基因表达影响 5
3 讨论 5
3.1 姜黄素对断奶仔猪ALT和AST的影响 5
3.2 姜黄素对断奶仔猪脂质代谢指标的影响 5
3 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: @351916072@
.3 姜黄素对断奶仔猪肝脏脂肪合成相关基因表达的影响 6
4 小结 6
致谢 7
参考文献 7
姜黄素对免疫应激断奶仔猪血清和肝脏脂代谢的影响
动物科学124班 邱静芸
引言
引言
免疫应激是畜禽在生产中，由于免疫系统受到细菌、病毒、内毒素等攻击，畜禽表现为采食量、增重、瘦肉沉积下降等，涉及免疫神经内分泌系统的复杂的生理反应[1]。在革兰氏阴性菌细菌外壁层中有一种特有的化学成分叫做细菌脂多糖（lipopolysaccharide，LPS），分子量不低于一千，是目前常用的免疫应激源。其作用机制是通过腹腔注射或静脉注射，经过胃肠道进入机体，作为一种免疫增强剂激活体内的单核细胞巨噬细胞等，引起细胞因子的合成和释放，从而导致机体产生病理或生理的损害[2]。免疫应激对现代畜禽生产造成了较大的困扰，采取一定的营养调控措施，人工建立猪免疫应激模型，尝试降低或消除免疫应激带来的危害将成为当今研究热点。
姜黄素（Curcumin）分子式为C21H12O6，是与药食同源的姜科植物姜黄的有效成分相同的二酮类化合物，微溶于乙醚和水,易溶于醋酸、氯仿、丙酮和乙醇等有机溶剂[3]。从国内外的研究中发现，姜黄素具有很多的生理作用，比如免疫调节、抗氧化、抗肿瘤、抗炎、抑制细菌、抗纤维化和保护肝脏肾脏等[4]，并具有对脂质代谢的保护作用[5]。还有研究证实姜黄素代谢物也具有降糖、抗高血脂、防止肝损伤的生理作用[6]。由于姜黄素色泽稳定，几乎无毒副作用，近年来，引起畜牧行业的广泛关注，有望成为畜牧行业新型的绿色饲料添加剂。
本试验以“杜×长×大”三元杂交断奶仔猪为研究对象，以LPS建立仔猪免疫应激模型。通过在仔猪日粮中添加姜黄素，研究姜黄素对免疫应激断奶仔猪血清和肝脏脂代谢的影响，为仔猪生产提供科学依据。
材料与方法
试验设计与动物的选择
试验在常州康乐农牧有限公司进行，仔猪在进入猪舍前对猪舍进行全面清扫消毒，试验前按照猪场常规管理程序进行驱虫与免疫防疫。选取24头体重相近、断奶日龄为28 d的“杜×长×大”三元杂交仔猪，公母各半。将24头试验仔猪随机分为3组，每组设8个重复，每个重复含1头仔猪。3个组处理方式分别为：（1）N组：对照组，基础日粮（2）NL组：基础日粮+LPS（3）CL组：基础日粮+200 mg/kg姜黄素+LPS。本试验姜黄素与基础日粮混合饲喂，LPS用无菌生理盐水溶解。于试验第18、28d清晨，对NL、CL组腹腔注射100 μg/kg BW LPS（空腹注射），对照组注射等量的生理盐水。所用试验基础日粮饲料营养组成满足或超出 NRC营养标准。姜黄素购买于广州科虎生物技术研究开发中心，其纯度>98%。LPS购于SigmaAldrich试剂公司。
饲养管理
采用自动乳头式饮水器供水，仔猪自由饮水。粉料饲喂，每天饲喂4次（7:30，11:30，15:00，19:00），仔猪自由采食。正式试验期间温度保持在2528 ℃，相对湿度维持在55%80%之间。保持圈舍内空气流通和清洁，定期进行常规消毒。试验期共28天。
样品采集
在最后一次注射LPS 24h后，将仔猪进行前腔静脉采血。采集的全血静置后，以3500 rpm/min离心15 min，吸取上层血清，转入1.5 mL离心管，20℃保存，待测。
在最后一次注射LPS 24h后，将所有仔猪颈放血处死，迅速打开腹腔，取出肝脏。采集肝脏样品放入液氮后，放入80℃保存。测定指标时，冷生理盐水漂洗，准确称量，按重量体积比用0.9%的无菌生理盐水于组织匀浆器中制成10%的组织匀浆液和1%的组织匀浆液，3500 rpm/min离心后吸取所得上清液，转入离心管，于20℃保存，待测。
测定指标方法
血清指标检测方法
肝脏功能相关指标
丙氨酸氨基转移酶（ALT）
天冬氨酸氨基转移酶（AST）
脂代谢相关指标
甘油三酯（TG）
总胆固醇（TCHO）
以上指标采用南京建成公司的试剂盒进行测定。
肝脏指标及检测方法
肝脏功能相关指标
丙氨酸氨基转移酶（ALT）
天冬氨酸氨基转移酶（AST）
脂代谢相关指标
甘油三酯（TG）
胆固醇（TCHO）
以上指标采用南京建成公司的试剂盒进行测定。
肝脏脂肪合成相关基因表达
目的基因的mRNA表达量见表1。
目录
摘 要 1
关键词 1
Abstract 1
Key words 1
引言 1
1 材料与方法 2
1.1 试验设计与动物的选择 2
1.2 饲养管理 2
1.3 样品采集 2
1.4 测定指标方法 2
1.4.1 血清指标检测方法 2
1.4.2 肝脏指标及检测方法 2
1.4.3 肝脏脂肪合成相关基因表达 3
1.5 数据处理与统计 3
2 结果与分析 4
2.1 姜黄素对断奶仔猪血清相关指标的影响 4
2.1.1 姜黄素对断奶仔猪血清AST和ALT指标的影响 4
2.1.2 姜黄素对断奶仔猪血清脂质代谢指标的影响 4
2.2 姜黄素对断奶仔猪肝脏相关指标的影响 4
2.2.1 姜黄素对断奶仔猪肝脏AST和ALT指标的影响 4
2.2.2 姜黄素对断奶仔猪肝脏脂质代谢指标的影响 4
2.2.3 姜黄素对断奶仔猪肝脏脂肪合成相关基因表达影响 5
3 讨论 5
3.1 姜黄素对断奶仔猪ALT和AST的影响 5
3.2 姜黄素对断奶仔猪脂质代谢指标的影响 5
3 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: @351916072@
.3 姜黄素对断奶仔猪肝脏脂肪合成相关基因表达的影响 6
4 小结 6
致谢 7
参考文献 7
姜黄素对免疫应激断奶仔猪血清和肝脏脂代谢的影响
动物科学124班 邱静芸
引言
引言
免疫应激是畜禽在生产中，由于免疫系统受到细菌、病毒、内毒素等攻击，畜禽表现为采食量、增重、瘦肉沉积下降等，涉及免疫神经内分泌系统的复杂的生理反应[1]。在革兰氏阴性菌细菌外壁层中有一种特有的化学成分叫做细菌脂多糖（lipopolysaccharide，LPS），分子量不低于一千，是目前常用的免疫应激源。其作用机制是通过腹腔注射或静脉注射，经过胃肠道进入机体，作为一种免疫增强剂激活体内的单核细胞巨噬细胞等，引起细胞因子的合成和释放，从而导致机体产生病理或生理的损害[2]。免疫应激对现代畜禽生产造成了较大的困扰，采取一定的营养调控措施，人工建立猪免疫应激模型，尝试降低或消除免疫应激带来的危害将成为当今研究热点。
姜黄素（Curcumin）分子式为C21H12O6，是与药食同源的姜科植物姜黄的有效成分相同的二酮类化合物，微溶于乙醚和水,易溶于醋酸、氯仿、丙酮和乙醇等有机溶剂[3]。从国内外的研究中发现，姜黄素具有很多的生理作用，比如免疫调节、抗氧化、抗肿瘤、抗炎、抑制细菌、抗纤维化和保护肝脏肾脏等[4]，并具有对脂质代谢的保护作用[5]。还有研究证实姜黄素代谢物也具有降糖、抗高血脂、防止肝损伤的生理作用[6]。由于姜黄素色泽稳定，几乎无毒副作用，近年来，引起畜牧行业的广泛关注，有望成为畜牧行业新型的绿色饲料添加剂。
本试验以“杜×长×大”三元杂交断奶仔猪为研究对象，以LPS建立仔猪免疫应激模型。通过在仔猪日粮中添加姜黄素，研究姜黄素对免疫应激断奶仔猪血清和肝脏脂代谢的影响，为仔猪生产提供科学依据。
材料与方法
试验设计与动物的选择
试验在常州康乐农牧有限公司进行，仔猪在进入猪舍前对猪舍进行全面清扫消毒，试验前按照猪场常规管理程序进行驱虫与免疫防疫。选取24头体重相近、断奶日龄为28 d的“杜×长×大”三元杂交仔猪，公母各半。将24头试验仔猪随机分为3组，每组设8个重复，每个重复含1头仔猪。3个组处理方式分别为：（1）N组：对照组，基础日粮（2）NL组：基础日粮+LPS（3）CL组：基础日粮+200 mg/kg姜黄素+LPS。本试验姜黄素与基础日粮混合饲喂，LPS用无菌生理盐水溶解。于试验第18、28d清晨，对NL、CL组腹腔注射100 μg/kg BW LPS（空腹注射），对照组注射等量的生理盐水。所用试验基础日粮饲料营养组成满足或超出 NRC营养标准。姜黄素购买于广州科虎生物技术研究开发中心，其纯度>98%。LPS购于SigmaAldrich试剂公司。
饲养管理
采用自动乳头式饮水器供水，仔猪自由饮水。粉料饲喂，每天饲喂4次（7:30，11:30，15:00，19:00），仔猪自由采食。正式试验期间温度保持在2528 ℃，相对湿度维持在55%80%之间。保持圈舍内空气流通和清洁，定期进行常规消毒。试验期共28天。
样品采集
在最后一次注射LPS 24h后，将仔猪进行前腔静脉采血。采集的全血静置后，以3500 rpm/min离心15 min，吸取上层血清，转入1.5 mL离心管，20℃保存，待测。
在最后一次注射LPS 24h后，将所有仔猪颈放血处死，迅速打开腹腔，取出肝脏。采集肝脏样品放入液氮后，放入80℃保存。测定指标时，冷生理盐水漂洗，准确称量，按重量体积比用0.9%的无菌生理盐水于组织匀浆器中制成10%的组织匀浆液和1%的组织匀浆液，3500 rpm/min离心后吸取所得上清液，转入离心管，于20℃保存，待测。
测定指标方法
血清指标检测方法
肝脏功能相关指标
丙氨酸氨基转移酶（ALT）
天冬氨酸氨基转移酶（AST）
脂代谢相关指标
甘油三酯（TG）
总胆固醇（TCHO）
以上指标采用南京建成公司的试剂盒进行测定。
肝脏指标及检测方法
肝脏功能相关指标
丙氨酸氨基转移酶（ALT）
天冬氨酸氨基转移酶（AST）
脂代谢相关指标
甘油三酯（TG）
胆固醇（TCHO）
以上指标采用南京建成公司的试剂盒进行测定。
肝脏脂肪合成相关基因表达
目的基因的mRNA表达量见表1。
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