斑马鱼slc3a2a基因在胚胎发育早期时空性表达的研究

slc3a2a基因在斑马鱼原肠期具有调节其外包、卵黄合胞体核(YSN)的定位、卵黄合胞体层(YSL)与包被层的质膜融合、YSL的微管动态运动以及维持胚胎形态等重要的作用。本研究通过构建pGEM-Teasy-slc3a2a重组质粒,合成地高辛标记的反义mRNA探针,运用原位杂交法和RT-PCR实验方法分别对2细胞、高囊胚、50%外包、14体节、受精后24h和48h六个斑马鱼胚胎早期发育时期的slc3a2a基因的时空性表达情况,以探讨该基因在早期发育各个时期的功能表达及其调节机制。结果显示slc3a2a基因在胚胎发育早期各个时期均有表达,其中14体节胚胎的slc3a2a基因表达量最高;在24hpf时期之前,该基因主要在胚胎的卵黄合胞体层(YSL)表达;在24hpf之后,该基因主要在胚胎的脑、眼部表达。
目录
摘要 1
关键词 1
Abstract 1
Key words 1
引言 1
1 材料与方法 2
1.1 材料 2
1.1.1 实验动物 2
1.1.2 主要试剂 2
1.2 方法 2
1.2.1 pGEMTeasyslc3a2a重组质粒的构建 2
1.2.2 slc3a2a探针的合成 3
1.2.3 原位杂交 4
1.2.4 RTPCR 5
2 结果与分析 5
2.1 菌落PCR的电泳结果及测序结果 5
2.2 pGEMTeasyslc3a2a质粒及酶切凝胶电泳结果 6
2.3 slc3a2a反义mRNA探针的凝胶电泳结果 6
2.4 slc3a2a的空间表达情况 7
2.5 提取总RNA凝胶电泳结果 7
2.6 cDNA PCR产物电泳结果 8
3 讨论 8
致谢 10
参考文献 10
斑马鱼slc3a2a基因在胚胎发育早期时空性表达的研究

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