地区猪沙门氏菌的流行病学调查
：为了解猪沙门氏菌在安徽、江苏地区正常猪群中的流行情况，对丹阳地区、和县地区、滁州地区、宿迁地区的四个猪场共成功无菌采集健康猪粪便363例。经过选择性增菌，划线培养和纯化后，共得到沙门氏菌阳性菌株12株，分离率高达3.3%。该结果表明安徽、江苏地区各猪场的沙门氏菌危害均有不同程度的发生，而沙门氏菌的流行性具有地区差异性，且与猪场的饲养条件、生活环境有关有关。结果显示30日龄以下猪群以及断奶后成年猪群感染沙门氏菌几率较低，50~70日龄猪群感染沙门氏菌几率较大。
目录
摘要3
关键词3
Abstract3
Key words3
引言3
1材料与方法4
1.1材料 4
1.1.1分离培养试剂4
1.1.2实验设备与仪器4
1.1.3 PCR鉴定4
1.2方法 4
1.2.1沙门氏菌的样品采集4
1.2.2沙门氏菌的分离培养4
1.2.3沙门氏菌的生化鉴定5
1.2.4沙门氏菌的PCR检测5
2结果与分析6
2.1实验结果6
2.2.1 各猪场沙门氏菌阳性PCR检测结果6
2.2.2不同日龄沙门氏菌阳性PCR检测结果6
2.2.3沙门氏菌生化鉴定结果 6
2.2.4沙门氏菌革兰氏染色结果 7
2.2.5沙门氏菌PCR检测电泳照片7
2.2实验结果分析8
3讨论 8
致谢9
参考文献9
图1沙门氏菌生化鉴定结果7
图2沙门氏菌革兰氏染色照片 7
图3沙门氏菌PCR检测电泳照片7
表?1?沙门氏菌属在不同选择性琼脂平板上的菌落特征5
表2各猪场沙门氏菌阳性PCR检测结果6
表3不同日龄猪群沙门氏菌阳性PCR检测结果 6
安徽、江苏地区猪沙门氏菌的流行病学调查
引言
引言
沙门氏菌（Salmonella）是一种主要寄生于人或动物肠道的革兰阴性杆菌，现今已发现共有约2500
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: &351916072&
多个血清型，其中在我国已发现200多种[1]。沙门氏菌形态和染色特性与同科的大多数其他菌属相似，呈支杆状，绝大多数沙门氏菌均以周生鞭毛运动，且均具有Ⅰ型菌毛，其适宜生长温度约为室温37℃ ，最适pH值为7.2~7.4[2]。沙门氏菌生存能力非常顽强，拥有很强的对外界因素的抵抗能力，如可以在干燥或者腐败等条件下生存，另外在7℃~45℃的环境下皆可繁殖，经历冷冻甚至冻干后仍然可以存活，在猪粪之中，沙门氏菌可以存活1~28个月的时间[3]。沙门氏菌中的2500多种沙门氏菌，有专门针对人类具有致病性的，有对人或动物同时具有致病性的，也有只对动物致病的，可以造成很大的人身安全隐患以及重大经济损失[4]。
猪霍乱沙门氏菌（Salmonella choleraesuis）是一种非伤寒性沙门菌，同时它也是引起3月龄以下仔猪副伤寒的主要病原。猪霍乱沙门氏菌在临床上经常会出现全身粘膜点状出血、盲肠、结肠、回肠的坏死性肠炎、以及淋巴结肿大等症状，具有很高的死亡率，在各大养殖场内普遍存在。而且该病症无季节性特征，常与猪瘟交叉感染，导致发病率与死亡率增高[5]。猪霍乱沙门氏菌的主要传播途径包括食物传播、水源传播以及直接接触或者通过污染用具传播，通常由于病猪将病原体以粪便、乳汁、尿液等形式排出体外，健康猪接触病原体后发病。同时也有可能出现健康猪本身便携带病原体，但暂时不发病，待因为外界环境影响导致健康猪的体质出现改变，便会出现发病现象[6]。同时，人在接触病猪或病猪肉制品的情况下，也会感染疾病。
2006年年初，整个华东地区爆发大规模的“猪高热综合症”，是整个养殖业遭受了毁灭性损失，甚至让很多农户不敢养猪[78]。该病具有广泛流行性，且传播扩散迅速，一处发病，会迅速波及到周边猪场；而且常见的治疗方法均难以起到理想的笑容，很容易造成猪场猪群的大规模死亡，造成严重损失。感染该病的猪表现高热（41~42℃）、嗜睡，其它症状不完全相同，如有的呼吸困难，有的腹泻。不同年龄的猪均可发病，年龄越小，死亡率越高；而且治疗效果不明显。这次大规模“猪高热综合症”中便有着猪霍乱沙门氏菌的影子[910]。
沙门氏菌的诊断手段现已成熟，根据法国梅里埃公司生化试剂盒，可建立完整的沙门氏菌生化检验方法。同时，PCR诊断也广泛运用于沙门氏菌的诊断之中，本实验室建立了针对invA基因的PCR方法，该方法可快速的检测出沙门氏菌，配合生化检测和革兰氏染色镜检，可有效鉴定出沙门氏菌的携带情况[1114]。
本次试验的目的，便是通过对安徽及江苏两省中丹阳、和县、滁州、宿迁四个地区的规模猪场进行采样，分析各猪场猪群中猪沙门氏菌的携带情况，以及沙门氏菌携带猪群的特性，为猪霍乱沙门氏菌的免疫防治工作做出积极的探讨。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 分离培养试剂
（1）缓冲蛋白胨水培养基（BPW）
用于沙门氏菌前增菌培养，由青岛高科园海博生物技术有限公司提供。
（2）亚硝酸盐胱氨酸增菌液（SC）、四硫磺盐煌绿增菌液培养基础（TTB）
用于沙门氏菌选择性增菌培养，由青岛高科园海博生物技术有限公司提供。
（3）亚硫酸铋琼脂（BSA）、木糖赖氨酸脱氧胆盐（XLD）琼脂
用于沙门氏菌的选择性分离培养，由青岛高科园海博生物技术有限公司提供。
（4）Luria~Bertani培养基（LB）
将10g?胰化蛋白胨(Tryptone)?、5g?酵母提取物(Yeast?extract)?、5g?NaCl、?1ml?1mol/L?的NaOH溶液调pH至7.4用去离子水定容至1L.高压下蒸汽灭菌20min.?
用于沙门氏菌的预培养，由上海哈林生物科技有限公司提供。
（5）ddH2O、DNA Marker2000、PCR Mix、Golden view、琼脂糖（AG）
用于沙门氏菌的PCR鉴定，由Omega公司提供。
1．1．2 设备与仪器
恒温箱（28℃~37℃） 由上海启前电子科技有限公司提供；
基因扩增仪QIQIAN~A100 由上海启前电子科技有限公司提供；
目录
摘要3
关键词3
Abstract3
Key words3
引言3
1材料与方法4
1.1材料 4
1.1.1分离培养试剂4
1.1.2实验设备与仪器4
1.1.3 PCR鉴定4
1.2方法 4
1.2.1沙门氏菌的样品采集4
1.2.2沙门氏菌的分离培养4
1.2.3沙门氏菌的生化鉴定5
1.2.4沙门氏菌的PCR检测5
2结果与分析6
2.1实验结果6
2.2.1 各猪场沙门氏菌阳性PCR检测结果6
2.2.2不同日龄沙门氏菌阳性PCR检测结果6
2.2.3沙门氏菌生化鉴定结果 6
2.2.4沙门氏菌革兰氏染色结果 7
2.2.5沙门氏菌PCR检测电泳照片7
2.2实验结果分析8
3讨论 8
致谢9
参考文献9
图1沙门氏菌生化鉴定结果7
图2沙门氏菌革兰氏染色照片 7
图3沙门氏菌PCR检测电泳照片7
表?1?沙门氏菌属在不同选择性琼脂平板上的菌落特征5
表2各猪场沙门氏菌阳性PCR检测结果6
表3不同日龄猪群沙门氏菌阳性PCR检测结果 6
安徽、江苏地区猪沙门氏菌的流行病学调查
引言
引言
沙门氏菌（Salmonella）是一种主要寄生于人或动物肠道的革兰阴性杆菌，现今已发现共有约2500
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: &351916072&
多个血清型，其中在我国已发现200多种[1]。沙门氏菌形态和染色特性与同科的大多数其他菌属相似，呈支杆状，绝大多数沙门氏菌均以周生鞭毛运动，且均具有Ⅰ型菌毛，其适宜生长温度约为室温37℃ ，最适pH值为7.2~7.4[2]。沙门氏菌生存能力非常顽强，拥有很强的对外界因素的抵抗能力，如可以在干燥或者腐败等条件下生存，另外在7℃~45℃的环境下皆可繁殖，经历冷冻甚至冻干后仍然可以存活，在猪粪之中，沙门氏菌可以存活1~28个月的时间[3]。沙门氏菌中的2500多种沙门氏菌，有专门针对人类具有致病性的，有对人或动物同时具有致病性的，也有只对动物致病的，可以造成很大的人身安全隐患以及重大经济损失[4]。
猪霍乱沙门氏菌（Salmonella choleraesuis）是一种非伤寒性沙门菌，同时它也是引起3月龄以下仔猪副伤寒的主要病原。猪霍乱沙门氏菌在临床上经常会出现全身粘膜点状出血、盲肠、结肠、回肠的坏死性肠炎、以及淋巴结肿大等症状，具有很高的死亡率，在各大养殖场内普遍存在。而且该病症无季节性特征，常与猪瘟交叉感染，导致发病率与死亡率增高[5]。猪霍乱沙门氏菌的主要传播途径包括食物传播、水源传播以及直接接触或者通过污染用具传播，通常由于病猪将病原体以粪便、乳汁、尿液等形式排出体外，健康猪接触病原体后发病。同时也有可能出现健康猪本身便携带病原体，但暂时不发病，待因为外界环境影响导致健康猪的体质出现改变，便会出现发病现象[6]。同时，人在接触病猪或病猪肉制品的情况下，也会感染疾病。
2006年年初，整个华东地区爆发大规模的“猪高热综合症”，是整个养殖业遭受了毁灭性损失，甚至让很多农户不敢养猪[78]。该病具有广泛流行性，且传播扩散迅速，一处发病，会迅速波及到周边猪场；而且常见的治疗方法均难以起到理想的笑容，很容易造成猪场猪群的大规模死亡，造成严重损失。感染该病的猪表现高热（41~42℃）、嗜睡，其它症状不完全相同，如有的呼吸困难，有的腹泻。不同年龄的猪均可发病，年龄越小，死亡率越高；而且治疗效果不明显。这次大规模“猪高热综合症”中便有着猪霍乱沙门氏菌的影子[910]。
沙门氏菌的诊断手段现已成熟，根据法国梅里埃公司生化试剂盒，可建立完整的沙门氏菌生化检验方法。同时，PCR诊断也广泛运用于沙门氏菌的诊断之中，本实验室建立了针对invA基因的PCR方法，该方法可快速的检测出沙门氏菌，配合生化检测和革兰氏染色镜检，可有效鉴定出沙门氏菌的携带情况[1114]。
本次试验的目的，便是通过对安徽及江苏两省中丹阳、和县、滁州、宿迁四个地区的规模猪场进行采样，分析各猪场猪群中猪沙门氏菌的携带情况，以及沙门氏菌携带猪群的特性，为猪霍乱沙门氏菌的免疫防治工作做出积极的探讨。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 分离培养试剂
（1）缓冲蛋白胨水培养基（BPW）
用于沙门氏菌前增菌培养，由青岛高科园海博生物技术有限公司提供。
（2）亚硝酸盐胱氨酸增菌液（SC）、四硫磺盐煌绿增菌液培养基础（TTB）
用于沙门氏菌选择性增菌培养，由青岛高科园海博生物技术有限公司提供。
（3）亚硫酸铋琼脂（BSA）、木糖赖氨酸脱氧胆盐（XLD）琼脂
用于沙门氏菌的选择性分离培养，由青岛高科园海博生物技术有限公司提供。
（4）Luria~Bertani培养基（LB）
将10g?胰化蛋白胨(Tryptone)?、5g?酵母提取物(Yeast?extract)?、5g?NaCl、?1ml?1mol/L?的NaOH溶液调pH至7.4用去离子水定容至1L.高压下蒸汽灭菌20min.?
用于沙门氏菌的预培养，由上海哈林生物科技有限公司提供。
（5）ddH2O、DNA Marker2000、PCR Mix、Golden view、琼脂糖（AG）
用于沙门氏菌的PCR鉴定，由Omega公司提供。
1．1．2 设备与仪器
恒温箱（28℃~37℃） 由上海启前电子科技有限公司提供；
基因扩增仪QIQIAN~A100 由上海启前电子科技有限公司提供；
版权保护: 本文由 hbsrm.com编辑，转载请保留链接: www.hbsrm.com/yxlw/dwyx/817.html
