hplc法测定鬼针草中芦丁金丝桃苷的含量
摘 要此次实验选择以芦丁和金丝桃苷这两种化学成分来作为对鬼针草的质量控制指标，采用HPLC来测定鬼针草提取物中芦丁和金丝桃苷这二者的含量，实验使用的是Water 2689-2895高效液相色谱系统进行测定，本实验采用的色谱柱的规格为AgilentHC-C18（4.6mm×250mm，5μm）；流动相采用乙腈-0.1%磷酸（1284）；采用1.0ml?min-1的流速；进样体积为10μl；检测波长为256nm；色谱柱的温度为30℃，本次实验运用的测定方法是外标法。从该实验的结果可以得出以下结论，芦丁在10.3～210mg?g-1的范围内具有良好的线性关系；精密度好，RSD值是1.03%；重复性好，RSD值是1.59%；稳定性好，RSD值是0.83%；回收率良好，平均回收率是99.62%，RSD值为1.35%；平均含量是0.079mg?g-1。金丝桃苷在20.5～410mg?g-1的范围内具有良好的线性关系；精密度好，RSD值是1.27%；重复性好，RSD值是1.18%；稳定性好，RSD值是0.29%；回收率良好，平均回收率是98.87%，RSD值是1.82%；平均含量是0.164mg?g-1。此次实验所建立的鬼针草中芦丁和金丝桃苷的HPLC检测方法快速、可靠、结果安全准确，为鬼针草的质量控制提供了理论依据。
目 录
1 概 述 1
1.1 选题的目的及意义 1
1.2研究进展 1
1.2.1 鬼针草的产地及地理环境 1
1.2.2 植物形态 1
1.2.3 药材性状 1
1.3 鬼针草的采收及加工 2
1.3.1 采收 2
1.3.2 加工 2
1.4 化学成分 2
1.4.1 黄酮类化合物 2
1.4.2多炔类化合物 3
1.4.3挥发油类 3
1.4.4有机酸类 3
1.4.5 其他成分 4
1.5 药理作用 4
1.5.1 降血脂、降血压的作用 4
1.5.2 抗癌作用 4
1.5.3 抑菌抗炎作用 4
1.5.4 防石溶石作用 5
1.5.5 抗干眼作用 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
5
1.5.6 保肝护肝作用 5
1.5.7 拟胆碱作用 6
2 实验部分 7
2.1 HPLC法测定鬼针草中芦丁、金丝桃苷的含量 7
2.1.1 实验仪器 7
2.1.2 试剂及药材 7
2.2 方法与结果 8
2.2.1 色谱条件 8
2.2.2 制备对照品溶液 9
2.2.3 供试品溶液的制备 9
2.2.4 线性关系考察 9
2.2.5 精密度试验 10
2.2.6 重复性试验 11
2.2.7 稳定性试验 11
2.2.8 加样回收率试验 11
2.2.9 样品测定 12
2.3 讨论 13
结 论 14
参考文献 15
致 谢 17
1 概 述
1.1 选题的目的及意义
鬼针草（学名：Bidens pilosaL.），为菊科一年生草本，是中国民间的常用草药，历史上从很早之前就开始使用鬼针草治疗疾病了，鬼针草的味道苦、药性平和无毒，它的功效是清热褪湿、消肿活血。主要治疗感冒发热、风湿关节疼痛、咽喉肿痛、上呼吸道感染、急性阑尾炎。近年来，随着人们对鬼针草研究的逐步深入，已经从鬼针草中发现黄酮类化合物、多炔类化合物、有机酸类、挥发油类、氨基酸和其他一些微量常量元素等多种化学成分。有研究表明，用鬼针草来降血压不仅安全可靠，而且还能够避免某些降压药性功能障碍的副作用[]。鬼针草药材中的主要成分为总黄酮[1]其能预防高脂血症、抑菌抗炎、镇静镇痛等作用；是具有广阔前景和研究价值的品种。对于鬼针草中黄酮的含量测定已经有报道，但是没有见到对鬼针草中芦丁、金丝桃苷的含量测定报道，因此本论文利用HPLC法检测方法对鬼针草中芦丁、金丝桃苷的两种成分进行含量测定。
1.2研究进展
1.2.1 鬼针草的产地及地理环境
鬼针草大多数生长在亚洲、美洲的热带以及亚热带地区，在我国分布广泛，主要产于中国华东、华中、华南、西南各省区，在四川、陕西等一些地方多生长于水边、河岸、湿地、村旁、路边及荒地中，多为荒野杂草，资源丰富，非常容易采集。鬼针草喜欢温暖湿润的气候，以疏松肥沃、富含腐殖质的砂质土壤及粘土壤栽培最好。
1.2.2 植物形态
鬼针草（Bidens bipinnata L.），1年生草本,茎干直立，茎干高约30~100cm,茎的形状为四棱形，有分枝，上部被有极稀疏的柔毛，基部的直径大约为0.30.6cm。鬼针草茎下部的叶片较小，分为3裂或不分裂，通常在开花前就枯萎了，鬼针草叶片对生部位为茎中部叶片和下部叶片,叶片颜色为暗绿色或者黄绿色，叶柄的长度约为3~6cm,叶片的长度约为4~14cm,小裂片的形状为三角形状披针形或者条状披针形, 先尖端或渐尖,鬼针草的裂片边缘是不规则的锯齿状,四周绒毛较短；上部的叶片互生,分裂成羽状。总苞基部被短柔毛，苞片7~8枚，条状匙行，上部稍宽，盘花筒状，通常有不发育的花朵，数量为1~3朵，每朵的长度大约为4.5mm。瘦果黑色，条形,略扁，具棱，长约7~1mm,宽约1mm,约具有3~4棱,上部具稀疏瘤状突起及刚毛，先端冠毛芒状,顶端芒刺约3~4枚,长约2~5mm,具倒刺毛，花期8~9月, 果期9~11月[2]。[]
1.2.3 药材性状
鬼针草药材的性状为干燥全草，茎干略呈方形，初生鬼针草的幼茎绒毛比较成熟鬼针草药材的绒毛来说略短，但是叶片轻薄，叶片像纸质一样很脆，用手轻轻揉搓则容易皱缩、破碎，非常容易脱落。茎的顶端通常有扁平状的盘状花托，像针束的样子大约有10个、果实的形状是四棱形，头状花序的总苞被有短小的柔毛；果实棕黑色,长条形,具3~4棱,先端有针状冠毛3~4条,具倒刺，气微,味淡。如图1.2。
图1.2 鬼针草
1.3 鬼针草的采收及加工
1.3.1 采收
鬼针草是一味一年生的中药材。对于全草类中药材的采摘时间，一般是以夏季枝叶茂盛时采集较好，这个时期植株生长旺盛，药用价值也很高。如果春天采摘，虽然药材比较嫩，但药材内部有效成分未达到最佳。鬼针草的药物积累和药效最佳的时间是夏末、秋初。所以一般是在夏、秋季开花盛期，收割地上部分，拣去杂草，鲜用或晒干。
目 录
1 概 述 1
1.1 选题的目的及意义 1
1.2研究进展 1
1.2.1 鬼针草的产地及地理环境 1
1.2.2 植物形态 1
1.2.3 药材性状 1
1.3 鬼针草的采收及加工 2
1.3.1 采收 2
1.3.2 加工 2
1.4 化学成分 2
1.4.1 黄酮类化合物 2
1.4.2多炔类化合物 3
1.4.3挥发油类 3
1.4.4有机酸类 3
1.4.5 其他成分 4
1.5 药理作用 4
1.5.1 降血脂、降血压的作用 4
1.5.2 抗癌作用 4
1.5.3 抑菌抗炎作用 4
1.5.4 防石溶石作用 5
1.5.5 抗干眼作用 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
5
1.5.6 保肝护肝作用 5
1.5.7 拟胆碱作用 6
2 实验部分 7
2.1 HPLC法测定鬼针草中芦丁、金丝桃苷的含量 7
2.1.1 实验仪器 7
2.1.2 试剂及药材 7
2.2 方法与结果 8
2.2.1 色谱条件 8
2.2.2 制备对照品溶液 9
2.2.3 供试品溶液的制备 9
2.2.4 线性关系考察 9
2.2.5 精密度试验 10
2.2.6 重复性试验 11
2.2.7 稳定性试验 11
2.2.8 加样回收率试验 11
2.2.9 样品测定 12
2.3 讨论 13
结 论 14
参考文献 15
致 谢 17
1 概 述
1.1 选题的目的及意义
鬼针草（学名：Bidens pilosaL.），为菊科一年生草本，是中国民间的常用草药，历史上从很早之前就开始使用鬼针草治疗疾病了，鬼针草的味道苦、药性平和无毒，它的功效是清热褪湿、消肿活血。主要治疗感冒发热、风湿关节疼痛、咽喉肿痛、上呼吸道感染、急性阑尾炎。近年来，随着人们对鬼针草研究的逐步深入，已经从鬼针草中发现黄酮类化合物、多炔类化合物、有机酸类、挥发油类、氨基酸和其他一些微量常量元素等多种化学成分。有研究表明，用鬼针草来降血压不仅安全可靠，而且还能够避免某些降压药性功能障碍的副作用[]。鬼针草药材中的主要成分为总黄酮[1]其能预防高脂血症、抑菌抗炎、镇静镇痛等作用；是具有广阔前景和研究价值的品种。对于鬼针草中黄酮的含量测定已经有报道，但是没有见到对鬼针草中芦丁、金丝桃苷的含量测定报道，因此本论文利用HPLC法检测方法对鬼针草中芦丁、金丝桃苷的两种成分进行含量测定。
1.2研究进展
1.2.1 鬼针草的产地及地理环境
鬼针草大多数生长在亚洲、美洲的热带以及亚热带地区，在我国分布广泛，主要产于中国华东、华中、华南、西南各省区，在四川、陕西等一些地方多生长于水边、河岸、湿地、村旁、路边及荒地中，多为荒野杂草，资源丰富，非常容易采集。鬼针草喜欢温暖湿润的气候，以疏松肥沃、富含腐殖质的砂质土壤及粘土壤栽培最好。
1.2.2 植物形态
鬼针草（Bidens bipinnata L.），1年生草本,茎干直立，茎干高约30~100cm,茎的形状为四棱形，有分枝，上部被有极稀疏的柔毛，基部的直径大约为0.30.6cm。鬼针草茎下部的叶片较小，分为3裂或不分裂，通常在开花前就枯萎了，鬼针草叶片对生部位为茎中部叶片和下部叶片,叶片颜色为暗绿色或者黄绿色，叶柄的长度约为3~6cm,叶片的长度约为4~14cm,小裂片的形状为三角形状披针形或者条状披针形, 先尖端或渐尖,鬼针草的裂片边缘是不规则的锯齿状,四周绒毛较短；上部的叶片互生,分裂成羽状。总苞基部被短柔毛，苞片7~8枚，条状匙行，上部稍宽，盘花筒状，通常有不发育的花朵，数量为1~3朵，每朵的长度大约为4.5mm。瘦果黑色，条形,略扁，具棱，长约7~1mm,宽约1mm,约具有3~4棱,上部具稀疏瘤状突起及刚毛，先端冠毛芒状,顶端芒刺约3~4枚,长约2~5mm,具倒刺毛，花期8~9月, 果期9~11月[2]。[]
1.2.3 药材性状
鬼针草药材的性状为干燥全草，茎干略呈方形，初生鬼针草的幼茎绒毛比较成熟鬼针草药材的绒毛来说略短，但是叶片轻薄，叶片像纸质一样很脆，用手轻轻揉搓则容易皱缩、破碎，非常容易脱落。茎的顶端通常有扁平状的盘状花托，像针束的样子大约有10个、果实的形状是四棱形，头状花序的总苞被有短小的柔毛；果实棕黑色,长条形,具3~4棱,先端有针状冠毛3~4条,具倒刺，气微,味淡。如图1.2。
图1.2 鬼针草
1.3 鬼针草的采收及加工
1.3.1 采收
鬼针草是一味一年生的中药材。对于全草类中药材的采摘时间，一般是以夏季枝叶茂盛时采集较好，这个时期植株生长旺盛，药用价值也很高。如果春天采摘，虽然药材比较嫩，但药材内部有效成分未达到最佳。鬼针草的药物积累和药效最佳的时间是夏末、秋初。所以一般是在夏、秋季开花盛期，收割地上部分，拣去杂草，鲜用或晒干。
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